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O-聚糖分析服务的甘露糖型

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创意蛋白质组学,作为生物科技产业的领导者,致力于用先进的仪器和专业研究团队锻造高质量的目标代谢组服务。我们提供高吞吐量,精度高,耗时短O型甘露糖多糖服务,这可能是满足客户的所有需求,以帮助您的科学研究。

概述

糖基化是在哺乳动物中最重要的翻译后修饰。有糖基化,O-糖基化和N-糖基化的两个主要类别,根据该聚糖 - 肽连接位点。最近,研究表明,O型甘露糖多糖,O型聚糖,起着大脑和肌肉的发育有重要作用。缺乏O型甘露聚糖导致先天性肌营养不良症,或α-营养不良。其中最有名的改性O型糖蛋白的是α-肌营养不良(α-DG)在人,这是主要成分的肌肉肌营养不良蛋白糖蛋白复合物(DGC)从骨骼肌膜隔离。α-DG被高度糖基化的,其聚糖戏剧在层粘连蛋白,神经毒素,串珠素和凝集素的以层粘连蛋白,神经毒素,G(LG)域和其他蛋白的结合中起重要作用。

目前,根据的GlcNAc的到曼残基结合位点,这些多糖可分为三个核心O形曼结构:芯M1糖胺(GlcNAc-β-1-2Man),核心M2 [型GlcNac-β-1-6(的GlcNAc-β-1-2)曼]和核心M3糖胺(GlcNAc-β-1-3GlcNAc-β-1-4Man)。芯M1和M2芯的外周的结构是由一系列糖基转移酶,如半乳糖基转移,唾液酸转移酶,葡萄糖醛酸,sulfonyltransferase和α-1mer -3-岩藻糖基在高尔基体的合成。新颖的完整芯M3结构最近被发现,所述特性包括:1)的人的6位上的磷酸化;2)串联式磷酸盐5-核糖醇(Rbo5P)结构;3)重复3GlcAβ1-3Xylα1结构;4)单GlcAβ1-4Xylβ1-4单元。

这三种类型的O型甘露途径。图1所示。这三种类型的O型甘露途径。

优势

  • 短时间
  • 灵敏度高,检测限制少
  • 精度高,重复性好
  • 高吞吐量
  • 定制服务

实验过程

o -甘露糖聚糖的分析通常采用LC-MS, LC-MS通过过甲基化将所有羟基转化为甲基醚,并通过其羧基的甲基酯化使唾液酸稳定,因此可以以正模式分析o -甘露糖聚糖。将过甲基化的o -甘露糖聚糖输注到MS装置中即可分析o -聚糖。

服务工作流程

  • 样品制备
  • O-glycan释放
  • 发布多糖的甲基化
  • 裂解聚糖糖苷外切酶或酸水解
  • 游离羟基的还原和衍生
  • 通过LC-MS分析和定量

在血清共同glycoproteomic分析的工作流程。图2所示。在血清共同glycoproteomic分析的工作流程。

样本要求

  • 血清/血浆:500μl /样品。
  • 必须避免反复冻结和解冻样品。在室温下血清样品在收集管中沉淀30分钟,然后将其运输到离心管,并以​​8000rpm离心5分钟。离心后,将上清液同等分为500μl/样品的冷冻管。

  • 蛋白质:100μg
  • 抗凝血(EDTA): 1ml。
  • 采集后必须立即加入抗凝剂和防腐剂,然后在-80°C下冷冻。

  • 尿液:1 ml /样品。
  • 尿液样本应均匀分成离心管,每管1ml,每管加入1/100 (w/v)叠氮化钠,-80℃保存。

  • 动物组织:200毫克/样品。
  • 样品采集后应立即用液氮冷冻,并运至-80℃保存。

  • 细胞数:≥1 × 107./样品。
  • 细胞活性应立即终止,以保持细胞的完整性。

  • 粪便:500毫克/样品

一般来说,为了确保足够的样本来满足整个项目,需要尽可能多地提供单一样本的体积。剩余的样本将免费存放一年并在必要时随时返回。所有样品都需要在-80°C下储存和运输,并尝试使用表面活性剂(SDS,Triton-X)和无机盐。

在单个组中不少于30例重复临床样品。

动物样品在单个组中不少于9例。

报告交付

  • 实验程序(中英文)
  • 仪器相关参数(中英文)
  • 用于鉴定物质的定量或定量信息
  • 质谱数据
  • 原始数据文件和详细的总结报告

服务周期

  • 样品测试:5-10个工作日
  • 数据分析:5-10个工作日

创新蛋白质组代谢分析平台致力于为多种靶物质提供全方位、可靠、准确的分析服务,适用于生命科学研究、药物探索、生物学测定等领域。我们真诚希望与您合作,协助您的科研工作。

参考文献

  1. Endo。肌营养不良与α -糖差聚糖的糖生物学。生物化学学报,2015,57(1):1-12。
  2. Endo。哺乳动物O型甘露糖聚糖:生物化学与glycopathology。PROC日本科学院丝氨酸乙物理学生物科学,2019,95(1):39-51。
  3. J.L. Praissman,T.维勒,M.O.的Sheikh等。功能O型甘露聚糖上的α-肌营养不良含有磷酸核糖醇引为matriglycan加成。网上生活,2016年,5。
  4. 沙玛,J. Cox, J. Glass等。糖尿病视网膜病变患者的血清糖蛋白组学改变。蛋白质组、2020、8(3)。

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