量化游离脂肪酸的分析方法

脂肪酸是一类由附着于羧基的烃基组成的羧酸化合物。脂肪酸通常以酯化的形式存在,作为脂质的组分,例如中性脂质,磷脂和糖脂(也称为脂肪酸酯或总脂肪酸)。酯化脂肪酸通过磷脂酶水解,得到游离脂肪酸(FFA),是一种非酯化脂肪酸,是脂质代谢产物的重要组成部分。一方面,外源性脂肪以游离脂肪酸的形式通过血浆运输进入脂肪细胞,然后合成脂肪储存,而体内内源性脂肪主要在肝脏合成,也通过血浆运输进入脂肪细胞储存。另一方面,储存的脂肪被不断降解,以游离脂肪酸的形式进入组织被氧化利用,使脂肪代谢处于动态平衡状态。研究表明游离脂肪酸与糖脂代谢异常及其他心血管疾病密切相关,如肥胖、高血压、高胰岛素血症、2型糖尿病等。

量化游离脂肪酸的分析方法

此外,食用油中的游离脂肪酸主要是甘油三酯的水解产物。游离脂肪酸不稳定,可以容易地导致油的氧化和速度,这影响了油的质量和功能。原油中的游离脂肪酸组合物可用于表征压榨油的质量,并评估油损伤程度。游离脂肪酸组合物可用作在不同水分,温度,氧含量,蓄冷和油炸过程中劣化油的参数。

目前,液相色谱 - 质谱(LC -MS)技术主要用于检测游离脂肪酸,在生物和油中的极低水平下发现。其结构中缺乏可容易电离的官能团可以导致质谱分析的低灵敏度。它们使用化学衍生化技术的结构改性是改善色谱行为并增强质谱响应的有效手段。

化学衍生化技术

将待测化合物与具有特定基团的衍生化试剂进行定量快速反应,生成符合要求的衍生化产物。然后间接测定衍生化产物的量,以确定分析物的量。化学衍生化可以改变分析物的检测特性,增加其对检测器的响应,并产生稳定的衍生化产物,以改善分析物的不稳定性。衍生化技术可以提高电离效率,减少复杂样品分析过程中的电离抑制,从而提高电喷雾质谱的检测灵敏度和选择性。衍生化技术适用于真实样品中含有目标官能团的代谢物的精确和相对定量。

游离脂肪酸检测方法

LC-MS是目前应用最广泛的检测方法脂肪酸的测定.LC分离游离脂肪酸需要在流动相中加入甲酸等有机酸,使被分析物保留在反相柱中,确保色谱分离。然而,电喷雾液滴中的弱酸可以携带许多负电荷,并抑制分析物羧酸负离子的形成。这抑制了分析物的电离效率,不利于分析物的质谱检测。因此,通过化学衍生化反应将羧酸类化合物转化为阳离子类化合物,并采用质谱的正离子检测模式进行分析,可以避免酸性流动相的离子抑制,提高电离效率。从而提高了电喷雾电离质谱(ESI-MS)的检测灵敏度。

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