游离脂肪酸(FFA)是脂质代谢的重要组成部分。在动物体内,许多膳食脂质在被吸收和进一步用于脂质合成之前被水解成游离脂肪酸。脂质可以通过脂解酶,如激素敏感脂肪酶、脂蛋白脂肪酶、磷脂酶A和C等水解成游离脂肪酸,然后以多种不同的方式代谢。
脂肪酸作为细胞能量的主要能量燃料,与糖尿病、冠心病、非酒精性脂肪肝等多种代谢性疾病有关。游离脂肪酸分析可作为疾病评估的潜在生物标志物。游离脂肪酸水平的检测还可以反映机体的脂质代谢、糖代谢和内分泌功能状态。此外,对食品成分和膳食补充剂(如鱼油)中各种脂肪酸亚型(如-3和-6)的分析也具有研究和商业意义。
在生物样品中,游离脂肪酸仅占总脂肪酸的10%,含量低,动态范围宽。Creative Proteomics开发了一个游离脂肪酸分析平台,可以同时检测和量化生物样品中尽可能多的游离脂肪酸。基于LC-MS/MS技术,可对尿液、全血/血清/血浆等多种生物样品进行定性定量检测。
创造性蛋白质组学使用负离子化学电离气相色谱联用三重四极质谱仪进行游离脂肪酸分析。
图一:免费脂肪酸分析服务流程。
细胞 | 细胞数量应保持在200万个以下(通常使用50万个细胞)。增加100ul内部标准。两体积的甲醇溶解细胞,并将混合物用HCl酸化至最终浓度25mm。 |
媒体 | 100uL内标加到0.5 ml介质中。然后样品与1体积的甲醇混合,用HCl酸化至最终浓度25 mM。 |
等离子体 | 对于血浆,300uL dPBS加200uL。然后加入100uL内标,与1体积的甲醇混合,用HCL酸化至终浓度25mm。 |
组织 | 对于组织,应根据使用的组织类型,事先根据经验确定用量。增加100uL内部标准。然后加入900uL甲醇。对于较硬的组织,样品被研磨/切碎,然后用声波进行检测。对于较软的组织,只需要超声。然后将样品混合。 |
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