植物激素分析方法“，

什么是植物激素?

植物激素是植物体内合成的对植物生长发育有重要影响的微量有机化合物。它们可以从生产地点转移到行动地点。它们可以在低浓度下调节植物的生长发育，几乎参与植物生长发育的每一个过程，从影响细胞分裂、伸长和分化到萌发、生根、开花、结果、休眠和脱落。植物激素主要包括乙烯，生长素，脱落酸，赤霉素，细胞分裂素，酸盐，brassinosteroids、水杨酸盐类等。此外，一些次生代谢物，如一氧化氮(NO)和最近发现的左曲内酯，也被认为以激素样的方式调节植物的生长发育。

当植物遭受生物和非生物伤害时，如病原体侵袭、虫害和动物的撕咬、干旱和盐胁迫，植物激素在启动防御反应方面也发挥着重要作用。

植物激素既可以通过调节生长发育直接影响作物产量，又可以通过参与调节作物对不利条件的适应来减少产量损失。植物激素的研究成果使作物产量的提高发生了革命性的变化，具有重要的农业应用价值。因此，准确测定植物体内的植物激素越来越受到人们的重视。

植物中的激素含量极低，在自然界中不稳定，容易受到其他次生代谢产物的干扰。此外，一些用于植物生理研究的植物突变材料非常珍贵，数量很少。因此，检测方法必须非常灵敏和特异。

植物激素的提取与纯化

植物激素作为植物次生代谢物的一个特殊群体，在植物体内的含量非常低，通常只有普通植物次生代谢物的万分之一甚至更低，在0.1~50 ng/g鲜重之间。

此外，植物提取物是复杂的多组分混合物，其中含有的次生代谢物会严重干扰植物激素的定性和定量分析。为了对植物激素进行鉴定和定量，需要建立和优化植物激素的提取纯化工艺，尽可能去除植物粗提取物中影响植物激素分析的杂质，并对目标化合物进行富集，以获得完全纯化的样品进行最终分析和测定。

植物材料的加工通常选择新鲜或冻干处理过的植物材料，在液氮冷冻条件下进行充分研磨。然后选择合适的提取方法，以溶剂提取为主，从这些材料中提取植物激素。有机溶剂提取的植物粗提物中含有大量的植物次生代谢物，而粗提物中植物激素含量极低。液相萃取、固相萃取和固相微萃取等纯化技术可以纯化和富集感兴趣的目标植物激素，减少或消除植物组织中大量复杂的背景干扰，使样品适合定量分析。

植物激素的检测

质谱法可以大大提高靶材的选择性。串联质谱(MS/MS)是利用时间串联离子阱质谱或空间串联三重四极杆质谱(QQQ)实现的。多反应监测(MRM)模式是植物激素定量中常用的方法。

质谱的高灵敏度大大减少了需要测量的样品量，使得对一些有价值的植物突变物质中内源激素的测定简单易行，可以同时检测多种植物激素。

超高效液相色谱(UPLC)采用小粒径(1.7 μm)填料柱进行分离，可承受高达1000 bar (1 bar = 105 Pa)的压力，具有较高的分离能力和快速的分析速度。UPLC与MS的结合大大提高了仪器的工作效率。UPLC-MS强大的分离效率和速度提供了大量的植物激素。