色氨酸是人体必需的氨基酸。它参与蛋白质合成,是许多重要生物活性分子的前体。色氨酸代谢在维持机体稳态中起着重要作用。色氨酸代谢途径可能在许多生理疾病的发生和发展中起重要作用。我们采用氘化色氨酸作为内标,在一定程度上纠正了基质效应,提高了定量分析的准确性和重现性。采用活性炭吸附法吸附去除血浆中内源性色氨酸及其代谢物,使基质更接近原始生物基质,成为构建标准曲线的替代基质,提高了定量分析结果的准确性。
Creative Proteomics提供基于高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)技术和液相色谱-质谱(LC-MS)方法的多种样品中色氨酸及其代谢物的快速测定。可获得色氨酸及其代谢物含量评价的高质量分析报告。探索色氨酸及其代谢物的变化规律与生物学过程的关系,对寻找有效靶点、相关疾病的诊断和疾病监测具有重要意义。
图1所示。通过犬尿氨酸途径代谢的_ -色氨酸方案。(Sadok 2017)。
实验获得的峰形良好,靶化合物和内标物的峰不受等离子体中杂质或内源性物质的干扰。该方法的样品前处理简单方便,分析时间短,且具有高通量的优点,有利于大样本量的测定。采用氘化色氨酸作为内标,可以在一定程度上减少样品前处理和电离引起的误差。LC-MS用于痕量样品物质的检测、定量分析结果
图2。色氨酸分析服务流程。
检测方法:标准曲线法、内标法
流动相:超纯水和甲醇(v/v, 45/55),含0.2%甲酸和5mmol /l乙酸铵
注入体积:4μl
流量:0.3毫升/分钟
洗脱模式:权力平等主义的洗脱
分析时间:3分钟
反应离子:正离子电喷雾电离
监控模式:多反应监测模式
电电压:5500 V
帘面气压:25ψ
雾化气体压力:50ψ
辅助气体压力:50ψ
精度(RSD):≤20%
平均采收率:108.40%
平均矩阵效应:83.55%
生物重复数量:植物样品至少6个生物重复,动物样品至少10个生物重复
样品包括动物、植物、微生物等多种样品类型,详情请与我们联系。
采用高效液相色谱-串联质谱联用LC-MS方法,建立了一种简便、快速、灵敏、低耗样量的色氨酸及其代谢物的准确定量测定方法。Creative Proteomics竭诚为您提供稳定可靠的分析工具,满足您多样化的分析需求。
参考文献
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