概括
色谱的主要分离理论是吻合的，当溶解在流动相中的物质通过固定阶段时，它将与固定相反应。然后研究人员可以根据不同的尺寸，强度和保留时间分离它们。
身体
这篇文章将为我们提供HPLC在检测氨基酸时的工作流程的清晰视图。
理论
在酸和碱中水解后，蛋白质样品将溶解流动相。然后我们可以使用RP-HPLC与C8反相荧光检测器检测各种氨基酸的含量。
仪器和试剂
我们主要使用高效液相色谱仪器。至于试剂，我们选择乙腈，丙酮，丙酮氯化乙酮，缓冲溶液，氢氧化钠溶液0.5mol / L，盐酸溶液0.01mol / L和6mol / L和氢氧化钡溶液6mol / L和乙酸，磷酸，氨基酸混合溶液，内标溶液，流动相溶液。当我们正在进行实验时，应准备一些解决方案。
样品制备和测量
A.蛋白质水解
将蛋白质样品加入约1mg的玻璃管用6mol / L盐酸1mL。然后密封开口。并在110摄氏度培养箱中加热16小时，外面会冷。然后将水解的样品溶液置于玻璃管中并使用NORLEUCINE作为内部标准溶液，然后应蒸煮。
B.衍生物的制备和测定
将约40微升的缓冲溶液添加到我们上面制造的样品中。然后我们可以加入丹酰氯溶液100微升和壳溶液15分钟。接下来，样品管应在100摄氏水中加热2分钟。然后我们将两种解决方案添加到样品管中以摇动15秒。最后一步是将10微升样品溶液添加到HPLC柱中并注意色谱图。
这些是用于检测氨基酸的HPLC的主要提示。至于最终步骤是计算数据。我们希望这些提示可以满足您的需求。