N-Glycan分析


N-Glycan分析

作为最重要的转录后修饰真核细胞中的蛋白质,蛋白质糖基化参与广泛的生物和生理过程,包括识别和调节功能,细胞通信,基因ex 细胞免疫,生长发育。

多糖的功能通常由寡糖的结构决定,寡糖主要在两个结构基上共价键连接在蛋白质上:天冬酰胺的酰胺基(N-glycans)或丝氨酸或苏氨酸上的羟基(O-glycans).由于寡糖的多样性,即使是在一个位点上的糖基化也能产生相当大的质量和电荷的异质性。虽然已经描述了n -聚糖分析的不同方法,但通常这些方法是基于PNGase F从蛋白质中酶释放n -聚糖,由于缺乏内在的发色体,释放聚糖的衍生,在分析前使用荧光标记。

作为最大的治疗蛋白群,mAb的疗效高度依赖于正确的糖基化模式。在Creative Proteomics中,我们的技术支持可以帮助您使用基于ce的n -聚糖分析来描述mAb和其他糖蛋白治疗药物的糖基化特征,这被认为是主要生物技术公司申请质量控制的黄金标准。在分离主要的聚糖峰并以聚糖标准进行鉴定后,可以确定抗体上发现的主要n -聚糖类型的相对丰度。

n -聚糖分析的工作流程如下:

利用PNGase F进行酶解解糖基化释放n -链聚糖
荧光标记释放聚糖存在的脱糖基蛋白;
通过毛细管电泳/LC-MS分析释放的主要聚糖

拥有经验丰富的生物分析人员和技术人员,Creative Proteomics可以为您的项目提供快速和专业的分析支持。


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