膜蛋白质鉴定


膜蛋白质鉴定

膜蛋白如受体和离子通道是细胞功能的关键调节因子。膜蛋白占多达三分之二的已知药物目标,突出了他们的关键药物重要性。

G protein-coupled受体(GPCRs)是最大的、最专业的膜受体和组也最医学重要,占50%以上的人类药物靶点和作为治疗各种疾病的目标条件包括癌症、心血管疾病、代谢、中枢神经系统和炎症疾病。

离子通道是另一类重要的膜蛋白药物靶点,占目前上市药物活性的10%。

尽管膜受体很重要,但要制备出足够数量的纯、正确折叠的膜受体是出了名的困难。

我们的膜蛋白质服务提供包括:

  1. 从细胞质,周质或细胞培养上清液中纯化。根据所用的表达宿主或表达载体,需要从细胞质,(细菌)周质或细胞培养上清液中纯化蛋白质,并且我们为这些应用中的每一个建立了优化的方案。
  2. 缓冲剂和洗涤剂筛选溶解和纯化。
    对于可溶性和膜蛋白,使用差示扫描荧光法(DSF)测定用于稳定性的最佳缓冲条件。如果适用,可以进行建立的活性测定以关联稳定性和活动状态。在膜或膜附着的蛋白质的情况下,需要洗涤剂从细菌或真核膜中提取蛋白质。洗涤剂在提取和纯化步骤期间针对蛋白质稳定性进行了优化。如果蛋白质被表示为包含体,则进行溶解和重折叠,包括用于最佳洗涤剂和缓冲条件的筛网。
  3. 使用他,rho1d4,gst或strep标签进行亲和力纯化。
    使用我们的高质量亲和净化基质来执行融合与他,GST或Strep标签类似于他的标签的蛋白质纯化。对于膜蛋白,我们建议使用Rho1D4系统。使用其他标签净化可根据要求提供。纯化条件以小规模进行优化,并且可以根据感兴趣的蛋白质达到Mg量的升级量。如果需要,可以在服务包中包含缓冲和洗涤剂优化,以提供最佳稳定性和活性的蛋白质。提供所有步骤的全面文档,包括SDS-PAGE和Western Blot数据。
  4. 进一步纯化步骤,用于结晶 - 就绪,均相蛋白质级分。
    为了获得高纯度、均匀的蛋白质组分,如适用于蛋白质结晶实验或功能结合分析,可以进行第二或第三个纯化步骤,例如使用阴离子或阳离子交换色谱或凝胶过滤。
    纯化条件以小规模进行优化,并且可以根据感兴趣的蛋白质达到Mg量。如果需要,可以在服务包中包含缓冲和洗涤剂优化,以提供最佳稳定性和活性的蛋白质。提供所有步骤的全面文档,包括SDS-PAGE和Western Blot数据。

创意蛋白质组学还提供以下生物信息学服务在膜蛋白质识别:
功能注释和富集分析
聚类分析
网络分析
统计分析

请随时联系我们讨论您的项目。我们希望您能发现我们可以满足您的研究需求。


*仅供研究用途。不用于诊断程序。
我们的客户服务代表每周7天24小时提供24小时。询问
在线询问

请提交您的项目的详细说明。我们将为您提供定制的项目计划,以满足您的研究要求。您还可以直接发送电子邮件查询。

  • 验证码
版权所有©2021创意蛋白质组学。版权所有。