糖肽微阵列测定


糖链微阵列等高通量分析技术的发展使糖组学领域发生了巨大的变化。它为研究蛋白质-聚糖相互作用提供了一种非常有价值和节省时间和材料的方法。然而,在大多数情况下,不仅聚糖结构,而且聚糖结构在肽主干上的呈现在蛋白质-聚糖相互作用中是重要的。此外,抗糖肽/糖蛋白的抗体通常识别肽主干作为结合表位的一部分。为此,一种新的糖肽芯片已经开发出来,以筛选针对不同糖肽抗原的抗体。这种技术可以识别新的结合表位,并清楚地揭示了针对不同但密切相关的糖肽抗原产生的抗体的选择性模式的差异。

相应的糖肽被预先合成,并配有n端间隔物,然后被固定在n -羟基琥珀酰亚胺酯(NHS)涂层微阵列载玻片上。在某些情况下,糖肽合成后被酶修饰,如糖基转移酶在溶液或原位在微阵列幻灯片上。所构建的糖肽微阵列与相互作用伙伴孵育,然后通过荧光检测或无标记方法(如质谱或表面等离子体共振成像)检测结合事件。

糖肽微阵列测定图1.糖肽微阵列工作流程的一个例子

糖肽芯片具有独特的能力来绘制抗体结合的决定因素和抗体识别谱。它为有效筛选酶底物的特异性或确定酶的糖基化位点提供了机会。糖肽芯片已被证明是一个高通量和强大的工具,用于抗体结合表位分析疫苗开发和临床生物标志物的发现。这可能是一个有价值的工具来研究抗体的免疫治疗和免疫诊断。糖肽芯片技术已应用于酶活性和底物特异性的研究,糖苷结合蛋白的鉴定,抗体表位的定位,自身抗体的检测和血清学诊断。

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