蛋白质是重要的大分子，在细胞和系统水平上促进不同的生物过程。巨大的分子过程是通过蛋白质间相互作用(protein - protein Interactions, PPIs)组织的大量蛋白质成分来调控的，PPIs是指两个或多个蛋白质之间建立的有意的物理接触，并导致特定的生化事件。这种相互作用是活细胞整个相互作用组学系统的核心，毫不奇怪，特定的PPIs与多种疾病相关。

图1.蛋白质 - 蛋白质相互作用热点和变构位点。（Turnbull A P.等。;2014）

蛋白质 - 蛋白质相互作用的发现和验证是了解这些蛋白质相互作用的条件的第一步和下方体内/体外及其互动背后的功能影响。如表1所示，下面列出了PPI研究中的一些流行方法。

表1。PPI研究中最常用的方法

创造性蛋白质组学中的蛋白质相互作用分析

我们的小组中应用了各种技术来研究PPI。每种方法都有自己的优点和限制。我们指示客户的最佳合适方法。我们的服务包括但不限于：

• 共免疫沉淀（CO-IP）

CO-IP是一个有用的在体外评估涉及复合物的蛋白质的方法，以及它是否紧紧地结合。PPI缩进利用靶蛋白质特异性抗体来捕获与特定靶蛋白结合的蛋白质。CO-IP使得能够捕获和净化不仅仅是主要目标，还可以涉及互动中涉及的其他宏观分子。

• 下拉试验

下拉试验能够检测两个或多个蛋白质之间的物理相互作用，并识别以前未知的PPIs。在下拉实验中，诱饵蛋白被标记并固定在亲和树脂上。当样品与诱饵蛋白孵育时，与诱饵蛋白结合的蛋白质将被捕获并“拉下”。

• 交联蛋白相互作用分析

交联蛋白相互作用分析适用于瞬时或弱相互作用，可以进行在活的有机体内或者在体外。在该方法中，分析溶液，如交联试剂或交联剂，使得通过共价结合而使蛋白质 - 蛋白质复合物相应地随后的分离和表征。

• 标签转移蛋白相互作用分析

已申请标签转移检测瞬态或弱PPI，这些PPI难以使用其他难以捕获在体外检测策略。标记转移试剂将用于标记与目标蛋白相互作用的蛋白质。新的非同位素试剂和方法的发展提高了标签转移分析的简单和方便。

• 远方印迹分析

基于免疫印迹的免疫印迹程序，也检测到PPI在体外并且不需要保留目标蛋白质的原生状态。在该方法中，纯化和标记的“诱饵”蛋白用于探测膜上的靶“猎物”蛋白。

两种或更多种与特定功能目标相互作用的蛋白质的结果可用于以几种不同的方式证明。蛋白质相互作用的可测量效应如下：

• 使蛋白质失活或变性
• 改变酶的动力学性质
• 创建一个新的结合位点，通常用于小效应分子
• 通过与不同的结合伙伴的相互作用改变蛋白质对底物的特异性
• 在上游或下游事件中担任监管角色
• 通过在域或亚基之间移动基板来允许基板沟道，从而最终在预期的最终产品中产生

Creative Proteomics拥有一支在蛋白质-蛋白质相互作用研究方面有特殊经验的科学家团队，我们的蛋白质-蛋白质相互作用网络平台将帮助您解读蛋白质-蛋白质相互作用，拓展您的研究前景。

我们的订购流程如下。如果您有任何问题或具体要求，请随时与我们联系。

参考：

1.张国强，张国强，张国强，等。基于片段的药物发现与蛋白-蛋白相互作用。生物化学研究与报告，2014,4:13-26。