糖蛋白在生物制药产品中的越来越多的使用要求快速有效的糖基化分析技术。蛋白质糖基化的表征需要完整的糖肽的鉴定。由于微异质性，在同一肽主干上相同糖基化位点上的不同识别糖肽可以被表征。一个糖肽的完整表征包括肽序列的鉴定，糖基化位点的分配，和聚糖链测序。

聚糖结构分析包括单糖组成、糖苷键和与苷元的连接。由于聚糖的多样性和异质性，其结构的表征仍然非常具有挑战性。质谱已成为一种常规的实验手段，以获取初级连接性和糖苷键信息。在质谱分析之前，可以通过酶或化学方法释放、纯化和衍生聚糖。

高特异性的外糖苷酶通常用于测定多糖的序列和结构。这些特殊的外糖苷酶去除末端糖基的非还原端聚糖，但不分裂单糖之间的内部键。通过使用不同的连接特异性外糖苷酶，可以对被移除的糖苷残基的糖苷键和糖基进行表征和鉴定。

图1：用于聚糖结构分析的糖苷酶

外糖苷酶消化结合高效液相色谱等分离技术是一种高效、快速的聚糖结构表征方法。

具有自由还原末端的聚糖可以用荧光标记进行化学标记，例如2-氨基吡啶（2-AP）、2-氨基苯甲酰胺（2-AB）、2-氨基苯甲酸（2-AA）、2-氨基萘三磺酸（ANTS）或1-氨基芘-3,6,8-三磺酸（APTS），提供检测灵敏度和可行的分离。单糖组成分析和连锁分析用于确定每个单糖的绝对构型以及连锁和分支点的出现。

由于聚糖的立体化学复杂性，必须将多种技术结合起来才能提供完全明确的结构信息。液相色谱和质谱是目前最有用和最强大的技术，高通量分析聚糖。新兴的质谱杂交分析技术离子迁移谱（IMS）与质谱联用，有利于等压聚糖的分离和表征。结构信息可以通过计算确定。

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参考文献
1.芭芭拉·穆洛伊、安妮·戴尔、帕梅拉·斯坦利和詹姆斯·H。普雷斯特加德，《糖生物学基础》。第三版。
2.克里斯托弗J。格雷，卢卡斯G。米加斯，佩迪塔E。Barran，Kevin Pagel等（2019）提出碳水化合物测序挑战的解决方案，j。化学。Soc。141, 37, 14463-14479.