通常不需要确定糖苷键，因为它们很少对糖蛋白的功能产生影响。然而，由于糖蛋白的聚糖结构的高复杂性，评估了N-聚糖的糖苷键的构造和位置是有帮助的。到目前为止，已知有五种常见的N-Glycan联系。在这五种联系中，N-乙酰葡糖胺至天冬酰胺（GlcNacβ1-ASN）是最常见的。对ASN的其他类型的联系包括：哺乳动物和古氏菌的层状蛋白，N-乙酰甘露黄酰胺（Galnac）在archaea，rhamnosein细菌中的葡萄糖。报告显示葡萄糖联系到蛋氨酸甜玉米。

N-聚糖通过PNGase F反应从糖蛋白释放。释放的N-聚糖用2-氨基苯甲酰胺（2-AB）标记，然后用多种外来糖苷酶消化。最后，通过具有荧光和质谱检测的亲水相互作用色谱（HILIC）分析聚糖和质谱检测。有几个步骤涉及N-甘油联系分析:

• 样品制备
• n-glycans释放
• 2-氨基苯甲酰胺(2-AB)标记和标记的聚糖依次与一系列外糖苷酶反应。
• UPLC-HILIC-FLD基础分析;
• 另外，如果需要，可以确认通过MS / MS碎片进行详细的聚糖结构。

*内皮糖苷酶用于什么？
内切糖苷酶释放来自糖蛋白或糖脂的寡糖。通常它不会从共轭蛋白和脂质分子中释放寡糖。通过在聚合物中破碎两种糖单体之间的糖苷键来用内糖苷酶。
内皮糖苷酶H：释放寡核糖和杂交N-聚糖
内糖苷酶F:释放简单双链n -聚糖

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