宿主细胞蛋白质(HCPs)是一组来自宿主细胞的异质、复杂的蛋白质。HCPs在分子质量、等电点、疏水性和结构上存在显著差异。图1显示了通过二维差异凝胶电泳(2D-DIGE)收获的细菌和哺乳动物发酵产物池。HCPs的鉴定和定量在生物制药产品的开发中具有重要意义，可以确保产品的纯度和患者的安全。HCPs的蛋白酶可以影响培养中的蛋白质模式，并影响纯化过程。此外，HCPs可以进行翻译后修饰，阻碍了定量和表征。此外，高HCP差异导致不同的生化特性，可能导致免疫反应或过敏反应，甚至过敏性休克。

图1收获产品的2D-DIGE银染色

尽管宿主细胞含有数千个hcp，这可能会污染最终产物，宿主细胞可以是各种生物体，如细菌、酵母和来自哺乳动物或昆虫物种的细胞系，对于生物药品中HCPs和其他杂质的表征和定量的适当方法的选择，没有明确的指南。此外，监管机构对每种蛋白质药物进行逐个检查，以确定适当的HCPs最大可接受水平和患者风险。

在工艺开发和生产过程中，对HCP进行识别和/或定量的适当测试方法的选择一直是一个值得关注的问题。用于HCP分析的方法可以分为免疫特异性方法，如western blotting和ELISA，或非特异性方法，如电泳和质谱。一般来说，定性或半定量方法足以用于样品纯化和批量释放。然而，在药物开发和鉴定过程中，理想的方法不仅要能够识别所有HCPs的种类，而且要定量、高通量、省时、省力。

创造性蛋白质组学提供了一系列检测和鉴定HCPs的方法(表1)。其中，ELISA、电泳和质谱是最常用的技术，有时它们也被结合使用来进行详细的鉴定。

表1,HCPs方法概述

技术平台

• 1D/2D -银染/考马斯亮蓝/SYPRO红宝石/ cydye /放射自显影

• 1D/2D -银染色/考马斯亮蓝-高效液相色谱-质谱(非靶标，散弹枪)

• 2D高效液相色谱-质谱(非靶向散弹枪)

• 高效液相色谱-质谱(靶MRM)

总结

• HCPs的鉴定/定量

报告

• 在整个项目结束时提供一份详细的技术报告，包括样品制备、实验程序和仪器参数。

• 染色结果、蛋白质列表(FDR<1%)/和浓度/数量将在报告中报告。

排序过程：