介绍
远WesternBlot是一种基于WesternBlot技术的分子生物学方法，用于检测体外蛋白质相互作用，特别是检测不需要所需蛋白质天然结构的相互作用。
far-Western blot技术的总体工作流程与Western blot类似，不同的是在Western blot中需要抗体来探测靶蛋白。而在遥远的西方分析中，不需要抗体，而是使用纯化和标记的“诱饵”蛋白来探测和检测膜上的目标“猎物”蛋白。在Western blot和far-Western blot中，蛋白质分别从SDS凝胶和PAGE凝胶中分离，然后将蛋白质从凝胶中转移到膜上。转移后，用经验浓度的牛血清白蛋白阻塞膜。然后对膜上的蛋白质进行变性和复性，这是一个可选步骤，取决于实验所需的结合条件。然后用一种已知的高度纯化的诱饵蛋白对膜进行探测。随着诱饵与猎物蛋白的反应，一种检测系统，依赖于所使用的诱饵蛋白，可以检测到与猎物蛋白相对应的波段信号。
远蛋白印迹分析的关键因素
虽然western blot是一种简便的方法，已被广泛应用于蛋白质相互作用的研究，但在保留蛋白质的天然构象和相互作用条件时必须注意。关于远蛋白印迹有几个问题。首先，对于在SDS凝胶中分离的蛋白质，这是一种变性条件，蛋白质变性。有可能是变性蛋白可能不会与诱饵蛋白相互作用，导致无法识别相互作用。其次，在结合实验前，蛋白质进行变性和复性，这也可能导致蛋白质潜在的构象变化，影响目标蛋白与诱饵蛋白的结合亲和力。第三，如果结合基序的暴露受到其他因素的调控，则有可能导致结合基序被埋入诱饵内部而无法到达诱饵，从而导致相互作用检测失败。更棘手的是，以非天然构象呈现的蛋白质可能以新的、人工的方式相互作用，导致假阳性相互作用。创造性蛋白质组学可以根据您的需要设计实验，并评估可能影响结果的潜在因素。我们保证高重现性的可靠数据。
远蛋白印迹分析的特点
远蛋白印迹分析的工作流程
我们的远蛋白印迹方法包括：
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