无标记定量是一种测定两个或多个生物样品中蛋白质相对含量的方法,但与其他定量方法不同的是,它不使用稳定的同位素来进行蛋白质的化学结合和标记。无标记定量蛋白质组学方法提供了一个强大的工具,从一个复杂的生物样品中解析和识别数以千计的蛋白质。在这种方法中,蛋白质首先被蛋白酶消化成肽混合物,然后通过串联质谱(MS/MS)进行分析,并通过数据库搜索进行鉴定。相对蛋白质丰度是通过光谱计数或色谱峰强度测量来确定的。与其他蛋白质组学方法相比,无标记定量方法快速、灵敏,使蛋白质动态范围比2DE提高了3 ~ 4倍。该方法也可以自动化,具有大规模蛋白质组分析的能力。
无标记定量方法在蛋白质组学领域非常流行,可能是该领域最直接的实验室技术。我们将利弊总结如下:
类别 | Label-free | 贴上标签 |
---|---|---|
机时间 | 更多的 | 少 |
湿式实验室复杂性时间 | 小 | 媒介 |
可比性的样本 | 困难 | 容易 |
数据分析 | 复杂的 | 复杂的 |
研究设计 | 灵活的 | 固定 |
我们的服务能够对复杂样品进行定量和定性分析,如细胞裂解液、组织匀浆液或生物流体。本实验的结果提供了所有样本中存在的蛋白质的目录,以及反映整个样本中观察到的蛋白质水平变化的统计分析,以及相关的通路信息。Creative Proteomics的无标签量化服务包括以下四个基本步骤:
图1所示。基于LC/ ms的无标签蛋白定量的典型工作流程。
创新蛋白质组学可以以节省时间和成本效益的方式提供无标签量化服务。无论您的蛋白质分析需要是什么,整个蛋白质组分析或特定蛋白质的量化,创造性蛋白质组学有正确的解决方案为您。我们有先进的平台和经验丰富的员工,可以加快您的蛋白质定量研究,请随时与我们联系。