荧光活化细胞分选(FACS)是根据每个细胞的特定光散射和荧光特性,将细胞的异质混合物分选成不同的同质亚群。在复杂的细胞混合物中,不同的同质亚群表面可能有不同的抗原和其他标记。这些标记可通过荧光标记进行标记,荧光标记可通过激光和荧光活化细胞分选的光检测器进行检测。它提供了快速,准确和高通量的细胞分析,并已被应用于研究各种生物过程,如细胞周期,细胞增殖,细胞活力,细胞表型,细胞信号,微核试验,细胞内细胞因子分泌。
图1.FACS的基本原理
荧光-激活细胞分类根据细胞特性或荧光标记自动确定细胞。根据细胞的物理特性和荧光标记特征对细胞进行分类的能力,使其能够以比其他分离方法(如磁分离)更有效的方式分离出定义明确的细胞亚群。荧光颜色的使用有助于同时检测不同的感兴趣的亚群,既省时又省力。绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因。另一个补充是单克隆抗体,它对其靶抗原具有高度特异性,并且可以很容易地与荧光素、藻胆蛋白和其他荧光色素偶联。单克隆抗体作为FACS试剂的广泛应用增强了细胞上或细胞内数百种靶抗原的定义。FACS也是克隆细胞的最有效方法,尤其是当细胞以极低的频率存在时。
图2。FACS的实验结果
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