O-连接的糖基化通常在分泌的和膜结合的蛋白中发现并在GOLGI中进行。它是指聚集糖与丝氨酸和苏氨酸的结合,随着羟脯氨酸和羟基碱基的程度。分泌和膜结合蛋白中的O-糖基化的主要类型似乎是加入还原末端N-乙酰甘酰胺(Galnac)。O-Linked Glycan也被认为是“粘蛋白类型”甘草。除了粘蛋白型O-连接的聚糖之外,许多哺乳动物蛋白质存在甘露糖(MAN),岩藻糖(FUC),葡萄糖(GLC),GAL或木糖(XEL),作为还原末端键。该组O-连接的甘草占蛋白质定位和运输,蛋白质溶解度,抗原性和细胞间相互作用。
图1.粘蛋白类型的核心结构。
联动分析是一种良好的联动位置确定的良好和巧妙的方法。原理是将稳定的取代基(醚连接的甲基)引入天然聚糖的每个游离羟基上。然后通过酸性水解切割比醚连接的甲基更不稳定的糖苷键,然后在先前参与连杆的位置处产生具有游离羟基的单个甲基化单糖。用还原剂(通常硼铁晶晶段)进行部分甲基化的单糖以引入新的羟基,可能在C-1处氘原子,这有助于鉴定每种单糖的还原端。然后将所有游离羟基乙酰化,得到可通过GC-MS鉴定的部分甲基化醇乙酸盐(PMAAs)。
创意蛋白质组学试图在四个方面提高O-糖基化分析,包括糖蛋白/肽富集,O-聚糖解离,O-聚糖结构鉴定和定量分析。
图2.我们的O-Glycan联动分析的工作流程。
样品的类型 | 蛋白质 | 细胞 | 动物组织 | 血液(EDTA抗凝) | 血清 | 尿 | 微生物样本 |
样本大小 | 100μg. | 1 x 10.7.细胞 | 1 G. | 1毫升 | 0.2-0.5 ml. | 2毫升 | 200毫克(干重) |
如果您对样品交付有任何疑问,请随时与我们联系,我们的专家始终可用。
创意蛋白质组学,具有经验丰富的生物科学家和OMICS研究中的先进分析技术,可以为我们的客户提供一系列糖类和生物信息学分析服务。请随意联系我们并看看我们如何帮助您解决您的问题。