介绍
共免疫沉淀，简称Co-IP，是一种应用广泛的技术，通过利用靶蛋白特异性抗体间接捕获与该特异性靶蛋白结合的蛋白，来识别生理相关的蛋白-蛋白相互作用。Co-IP作为IP的延伸，不仅可以捕获和纯化一级靶标，还可以捕获和纯化其他通过天然相互作用与靶标结合的大分子。IP与合作IP的区别是本次实验的重点。IP主要集中在与抗体结合的主要靶点上。然而，Co-IP以二级靶点为靶点，二级靶点与一级蛋白质相互作用，而不是抗体。在免疫沉淀之后，在珠上捕获的蛋白质被洗涤和洗脱，以获得纯化的一级和二级靶蛋白。这些靶蛋白可以通过多种方法进行表征，如western nlot和散弹枪策略下的质谱分析，以确定伴侣蛋白id、结合亲和性、结合动力学和初级蛋白未发现的功能。
Co-IP的关键因素:
作为一种强大的技术，Co-IP经常被生物化学家用来探索蛋白质之间的相互作用。虽然Co-IP方法很简单，但通过Co-IP反应识别生理蛋白-蛋白相互作用并不容易，因为相互作用的不稳定性、与IP试剂的非特异性结合以及抗体污染。以上所有问题都可能对蛋白质相互作用的检测产生负面影响。
蛋白质复合物的Co-IP
由于Co-IP依赖于蛋白-蛋白相互作用来检测结合蛋白，因此Co-IP整个过程中生理相互作用的结合亲和性和稳定性非常重要。不充分的结合时间和大量的洗涤步骤可能会降低结合效率，导致检测不到蛋白质相互作用。因此，对于预测具有较弱结合亲和或动态相互作用的蛋白质，需要进一步稳定蛋白质-蛋白质相互作用，如在Co-IP之前可进行交联。
不具体的交互
细胞膜和细胞器的破裂使大量被边界分隔的蛋白质释放出来接触。因此，不可避免地会出现非特异性交互作用，即假阳性交互作用，干扰数据分析。这对于已经展开或柔性区域的蛋白质尤其常见，这些区域相对粘性和非特异性结合其他蛋白质。缓解这些问题的方法可以是使用一抗去除非特异性蛋白的裂解液的预先清除，以及改变缓冲液的离子强度以减少非特异性结合。
创造性的蛋白质组学可根据客户需求提供定制的实验设计和优化Co-IP参数。我们承诺与我们经验丰富的科学家和技术人员进行可靠的蛋白质相互作用的Co-IP分析。
Co-IP服务特点:
我们的共同知识产权服务包括:
排序过程：
