我们都知道,高效液相色谱法应该是最流行的氨基酸成分分析方法。然而,氨基酸分析有很多种类型。在这篇文章中,我们将讨论一些常见的方法。
检测类型
在大多数情况下,使用紫外检测氨基酸需要利用羧基在200到210 nm范围内的吸收。一般来说,有些氨基酸很难以足够的灵敏度和选择性进行分析。最后,衍生化方法已经使用了很长时间,包括多种类型。
Pre-label方法
该方法在注射前先对氨基酸进行衍生物化,然后对反应产物进行分离检测。使用这种方法有一些优点:
- 通过指定一个小的反应系统,试剂消耗率可以降到最低。
- 它允许使用更昂贵的试剂增加灵敏度,这些试剂提供较低的背景水平。
- 即使检测到未反应的衍生试剂,只要在柱中分离,也不是问题。
预标签法的缺点:
- 样品基体会影响衍生化反应的效率。
- 反应产物往往不稳定,可能影响定量结果。
柱后反应检测方法
柱后衍生化方法包括氨基酸分离、衍生化试剂输送和混合等步骤,使其与氨基酸发生反应后再送至检测器。这种方法的一些优点如下:
- 它可以自动提供优良的定量性能和再现性。
- 由于反应前样品组分的分离,反应效率如果不那么容易受到样品基体的影响,这使得它可以应用于更广泛的样品。
列后衍生化的缺点:
- 不适合高灵敏度分析。
- 试剂用量较高
- 衍生化试剂种类有限。
- 不能使用快速反相色谱法。
这些是氨基酸成分分析方法的一些信息。并对这些方法提供了一些参考。
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