宿主细胞蛋白(HCPs)是生物制品生产过程中产生的关键工艺相关杂质之一，可导致患者不良免疫反应和超敏反应。也存在导致产品蛋白质降解的问题，影响产品的安全性和有效性，是关键的质量控制指标。
HCPs检测方法
HCPs残留检测中应用最广泛的方法是ELISA，操作简单，灵敏度高，通量高，是HCPs残留检测的日常释放试验方法。国家药典规定使用酶免疫法检测HCPs残留。
然而，酶联免疫吸附法检测HCP残留仍面临诸多挑战。在实际生产过程中，宿主源、生产工艺、净化方法、生产规模等都可能对HCPs的种类和复杂性产生影响。例如，使用商用通用HCP ELISA试剂盒检测产品中的HCP，由于其抗体特异性和适用性较低，容易漏检，对生物制品的质量和安全构成风险。此外，商业HCP ELISA试剂盒在更换批次时需要再次验证。
在单克隆抗体药物的生产中，蛋白a可以有效地去除HCPs残留，但基因治疗药物如AAV和溶菌酶病毒没有这样的去除HCPs的过程。然而，在基因治疗药物如AAV、溶酶病毒等的生产中，还没有去除HCPs的过程。因此，尤其对于CGT产品，有必要对HCPs的残留进行综合分析和检测。
随着蛋白质组学技术的发展，采用二维电泳、LC-MS等方法辅助分析生物制品中HCPs的组成，可以更客观、全面地验证HCP ELISA试剂盒检测的特异性和HCP的实际覆盖范围，2D- sds - page是相对于ELISA的正交方法，可用于HCPs的表征和分析。
HCPs LC-MS/MS分析(Strasseret al。, 2021)
HCPs分析策略
鉴于上述风险和法规要求，建议在对HCPs进行全尺寸分析时考虑以下因素。
- 使用ELISA进行产品开发前分析必须进行适用性验证，包括特异性和抗体覆盖率的分析验证;抗体覆盖率可以通过使用二维电泳和质谱方法的正交分析来验证。
- 辅助利用二维、质谱等蛋白质组学技术分析实际工艺样品中HCPs的残留量和组成，特别是其中可能存在的特定高危HCPs，可以有效提高检测结果的准确性，保证产品质量安全。
基于ELISA技术和Orbitrap质谱平台，Creative Proteomics可以为您提供HCPs检测服务用于生物制剂中HCPs残留鉴定、HCPs抗体覆盖分析等。
参考
斯特拉瑟，L.，奥利维埃罗，G.等人(2021)。使用自动样品制备和数据独立采集LC-MS/MS检测和定量单克隆抗体药物产品中的宿主细胞蛋白。药物分析，11(6)，726-731。