蛋白质在体内占有特殊的地位，是原生质的主要成分，与核酸一样，是生命现象的物质基础。蛋白质作为生命的物质基础之一，在催化各种生物在体内的反应、调节代谢、抵抗外来入侵和控制遗传信息等方面发挥着重要作用。蛋白质的分离和表征、定量分析是生物化学和其他生物学、食品检测、临床检测、疾病诊断、生物制药分离纯化和质量检测中最重要的工作。目前蛋白质鉴定的方法很多，本文将对几种常用的方法进行讨论和介绍:
蛋白质测定的紫外吸收法
该方法通过测定280 nm处酪氨酸和色氨酸的特征吸收量来估算蛋白质的含量，具有简单、灵敏、快速等优点，鉴定后仍可回收利用。在蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环上含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外线的性质。当吸收峰在280nm处时，吸光度与蛋白质含量成正比。此外，蛋白溶液在238nm处的光吸收值与肽键含量成正比。通过比较蛋白质溶液的光吸收值与某一波长下的蛋白质浓度，可以测定蛋白质含量。
考马斯蓝法测定啤酒中蛋白质含量
带负电荷的考马斯亮蓝染料与带正电荷的蛋白质结合。当染料在溶液中，它是红色的，在465纳米处吸收，但当它与蛋白质中的基本氨基酸结合时，它变成蓝色，在595纳米处吸收。然后可以将样品中的吸收值与标准曲线进行比较。考马斯蓝包括G250和R250, G250是常用的蛋白质含量鉴定方法，因为与蛋白质的结合反应比较平稳。虽然R250和G250之间的反应相对较慢，但它可以被洗脱，以便用于电泳带染色。该方法反应灵敏，是Lowry法反应灵敏的4倍。该方法可鉴定微因子蛋白的蛋白质含量，蛋白浓度在0 ~ 1 000μg / mL范围内。
高压液相色谱法
近年来，高压液相色谱技术也被广泛应用于蛋白质的分离和测定。由于蛋白质的大小、形状、电荷、疏水性、功能等特性，以及来源和实验要求，有不同类型的HPLC模型可以用来分离靶蛋白。为了检测更方便、准确的蛋白质鉴定方法，科学家们研究了多种高效液相色谱联合技术。目前最常用的联合技术有HPLC-MS、HPLC-CE、HPLC-ITP、HPLC-ICP-AES。
电泳方法
电泳是带电粒子在电场的作用下在电极的相反方向上运动的过程。蛋白质电泳分离是生物化学分离纯化的重要技术之一，有琼脂糖凝胶电泳、淀粉凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等，要看选用的配套使用!蛋白样品的制备是Western Blotting的第一步。样品制备是一个关键步骤，要求尽可能多地获得所有蛋白质。如:在适当的盐浓度下保持蛋白质的最大溶解性和重现性;合适的表面活性剂和还原剂破坏所有非共价键结合的蛋白质复合物和共价键二硫键，形成各自多肽的溶液;尽量去除核酸、多糖、脂质和其他干扰分子。
更多的蛋白质鉴定方法
除了这些方法，我们在这篇文章中分享了，雾霾活性蛋白测定法，凯氏定氮法，酶联免疫吸附法等。这些方法可以提高蛋白质鉴定的准确性和效率，应用于各个领域。
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