代谢组学创造性蛋白质组学

创造性的蛋白质组学代谢组学

硫酸软骨素和硫酸皮聚糖分析服务

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创新蛋白质组,作为生物技术行业的领导者,以先进的仪器设备和专业的研究团队,致力于打造高质量的靶向代谢组学服务。我们提供高通量、高精度、短时间的硫酸软骨素和硫酸皮胺分析服务,可以满足客户的所有需求,协助您的科研工作。

概述

硫酸软骨素(Chondroitin sulfate, CS)和硫酸皮胺(dermatan sulfate, DS)以蛋白聚糖的形式广泛分布于细胞表面和细胞外基质,参与多种生理过程。CS/DS的功能多样性主要是由于其较高的结构变异性。作为糖胺聚糖(GAG)家族的主要成员,硫酸软骨素(CS)/硫酸皮肤素(DS)链共价结合核心蛋白形成CS/DS蛋白聚糖(CS/DSPG)。

CS / DS的结构。CS / DS链包括与N-乙酰丙酰胺(Glanca)连接的D-葡糖醛酸(GLCA)或L-ADEOO糖酸(IDOA)糖基化[(-4glcaβ1-3galnacβ1-)或(-4idoaα1-3galnacβ1-)。CS / DS链通过GAG-蛋白结四糖共价连接到核心蛋白质上图1. CS / DS的结构。CS / DS链包括与N-乙酰丙酰胺(Glanca)连接的D-葡糖醛酸(GLCA)或L-ADEOO糖酸(IDOA)糖基化[(-4glcaβ1-3galnacβ1-)或(-4idoaα1-3galnacβ1-)。CS / DS链通过GAG-蛋白结四糖共价连接到核心蛋白质上

已经表明,CS / DS的异常表达与各种疾病的发生和发展密切相关,例如脑损伤后胶质瘢痕形成,肿瘤转移,骨病和病毒感染,这表明CS /的治疗DS-劣化酶应影响相关疾病的进展。细胞和组织中Cs / Ds或Cs / dspgs的异常表达也与许多致癌方法密切相关,包括细胞生长和存活,粘附,迁移和侵袭。一系列研究表明,CSases具有抗肿瘤的潜在应用价值。

优势

  • 多糖的高覆盖率
  • 高灵敏度和少数检测限制
  • 精度高
  • 先进的平台和策略

实验过程

  • 从细胞膜或血清中提取纯化鞘脂糖
  • 用葡萄糖苷酶释放糖磷脂糖甘油
  • 糖的全部甲基化
  • 基于2-AB标记的分析
  • 通过飞行时间谱分析完全甲基化族聚糖

服务工作流程

CS/DS的生物合成是一个复杂的、多步骤的酶适应过程,它发生在内质网/高尔基体中,并从GAG蛋白连接区域的合成开始,该连接区域与嵌入在不同核心蛋白中的丝氨酸残基共价连接。该合成过程由特定的四糖结构GlcAβ1-3Galβ1-3Galβ1-4Xylβ1连接,其中Gal-和木糖-分别代表半乳糖和木糖残基。该结构由四糖序列中相应的糖基转移酶催化。首先,通过木糖转移酶的催化,木基残基与核心蛋白的特定Ser残基连接;β 1maginol4 -半乳糖基转移酶i和β 1maginol3 -半乳糖基转移酶II依次催化两个半乳糖基残基的连接。最后,将GlcUA残基加入到葡萄糖醛酸转移酶I残基中,形成四糖连接区。

糖胺聚糖代谢服务流程。图2所示。糖胺聚糖代谢服务流程。

样品的要求

  • 血清/血浆:500μl /样品
  • 必须避免反复冻融样品。血清标本在室温下在收集管中沉淀30分钟,然后运至离心管,8000转/分离心5分钟。离心后将上清均匀分成500ul /试样的冷冻管。

  • 蛋白质:100µg
  • 抗凝血(EDTA): 1ml
  • 在收集后必须立即添加抗凝血剂和防腐剂,然后在-80°C下冷冻。

  • 尿液:1 ml /样品
  • 尿液样品应同等分为每管1mL的离心管,每根管加入1/100(w / v)叠氮化钠并储存在-80℃。

  • 动物组织:200毫克/样品
  • 应立即在液氮中冷冻样品,然后在收集后运输至-80℃以进行储存。

  • 细胞:≥1×107/样本
  • Cytoactive应该立即终止以维持细胞完整性。

  • 粪便:500毫克/样品

一般来说,为了保证有足够的样品来完成整个项目,需要尽可能多的提供单个样品的体积。剩余样品将免费保存一年,并在必要时随时退还。所有样品都需要在-80°C下储存和运输,尽量避免使用表面活性剂(SDS、Triton-X)和无机盐。

单组重复临床样本不少于30例。

单组动物标本重复不少于9例。

报告交货

  • 实验程序(中英文)
  • 装置的相关参数(中英文)
  • 用于鉴定物质的定量或定量信息
  • 质谱数据
  • 原始数据文件和详细的摘要报告

服务周期

  • 样品检测:5-10个工作日
  • 数据分析:5-10个工作日

创意蛋白质组学代谢分析平台致力于各种目标物质的全息,可靠和准确的分析服务,适用于生命科学研究,药物勘探,生物学测定等领域。我们真诚希望与您合作,助致您的科学研究。

参考

  1. S. Ashworth,J. Harrington,G.M.哈蒙特等人。硫酸软骨素硫酸盐作为角膜干细胞利基的潜在调节剂。前电池DEV BIOL,2020,8:567358。
  2. 王伟,石磊,秦勇,等。硫酸软骨素/硫酸皮聚糖降解酶的研究与应用。生物医学工程学报,2018,35(4):560442。

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