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硫酸软骨素(Chondroitin sulfate, CS)和硫酸皮胺(dermatan sulfate, DS)以蛋白聚糖的形式广泛分布于细胞表面和细胞外基质,参与多种生理过程。CS/DS的功能多样性主要是由于其较高的结构变异性。作为糖胺聚糖(GAG)家族的主要成员,硫酸软骨素(CS)/硫酸皮肤素(DS)链共价结合核心蛋白形成CS/DS蛋白聚糖(CS/DSPG)。
图1. CS / DS的结构。CS / DS链包括与N-乙酰丙酰胺(Glanca)连接的D-葡糖醛酸(GLCA)或L-ADEOO糖酸(IDOA)糖基化[(-4glcaβ1-3galnacβ1-)或(-4idoaα1-3galnacβ1-)。CS / DS链通过GAG-蛋白结四糖共价连接到核心蛋白质上
已经表明,CS / DS的异常表达与各种疾病的发生和发展密切相关,例如脑损伤后胶质瘢痕形成,肿瘤转移,骨病和病毒感染,这表明CS /的治疗DS-劣化酶应影响相关疾病的进展。细胞和组织中Cs / Ds或Cs / dspgs的异常表达也与许多致癌方法密切相关,包括细胞生长和存活,粘附,迁移和侵袭。一系列研究表明,CSases具有抗肿瘤的潜在应用价值。
CS/DS的生物合成是一个复杂的、多步骤的酶适应过程,它发生在内质网/高尔基体中,并从GAG蛋白连接区域的合成开始,该连接区域与嵌入在不同核心蛋白中的丝氨酸残基共价连接。该合成过程由特定的四糖结构GlcAβ1-3Galβ1-3Galβ1-4Xylβ1连接,其中Gal-和木糖-分别代表半乳糖和木糖残基。该结构由四糖序列中相应的糖基转移酶催化。首先,通过木糖转移酶的催化,木基残基与核心蛋白的特定Ser残基连接;β 1maginol4 -半乳糖基转移酶i和β 1maginol3 -半乳糖基转移酶II依次催化两个半乳糖基残基的连接。最后,将GlcUA残基加入到葡萄糖醛酸转移酶I残基中,形成四糖连接区。
图2所示。糖胺聚糖代谢服务流程。
必须避免反复冻融样品。血清标本在室温下在收集管中沉淀30分钟,然后运至离心管,8000转/分离心5分钟。离心后将上清均匀分成500ul /试样的冷冻管。
在收集后必须立即添加抗凝血剂和防腐剂,然后在-80°C下冷冻。
尿液样品应同等分为每管1mL的离心管,每根管加入1/100(w / v)叠氮化钠并储存在-80℃。
应立即在液氮中冷冻样品,然后在收集后运输至-80℃以进行储存。
Cytoactive应该立即终止以维持细胞完整性。
一般来说,为了保证有足够的样品来完成整个项目,需要尽可能多的提供单个样品的体积。剩余样品将免费保存一年,并在必要时随时退还。所有样品都需要在-80°C下储存和运输,尽量避免使用表面活性剂(SDS、Triton-X)和无机盐。
单组重复临床样本不少于30例。
单组动物标本重复不少于9例。
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