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鞘糖脂(GSLs)是19世纪晚期德国化学家约翰内斯·图迪丘姆(Johannes Thudichum)在伦敦实验室分析人脑成分时发现的。Thudichum仔细地鉴定了遇到的新脂类的结构,由不同的脂类与连接的糖或磷酸胆碱基团组成。在脊椎动物中,鞘糖脂具有很大的结构异质性,迄今已鉴定出300多种不同的多糖。
图1所示。鞘脂合成途径。
在细胞中,GSL的分子合成始于内质网(ER),丝氨酸棕榈酰转移酶(SPT)从丝氨酸和棕榈酰辅酶a生成酮-鞘氨醇。它们被分为几个亚科,包括ganglio-、globo-和neolacto-系列的GSLs。鞘糖脂上的各种糖结构对分子识别具有重要作用。病毒和致病性细菌黏附素利用宿主细胞表面的鞘糖脂结合和侵袭上皮细胞,这种结合对聚糖结构具有微生物特异性。鞘糖脂除了是细胞识别的关键成分外,具有不同糖结构的鞘糖脂也参与细胞信号传导。
图2所示。各类动物样本中常见鞘糖脂分析工作流程。
必须避免反复冻融样品。血清标本在室温下在收集管中沉淀30分钟,然后运至离心管,8000转/分离心5分钟。离心后将上清均匀分成500ul /试样的冷冻管。
采集后必须立即加入抗凝剂和防腐剂,然后在-80°C下冷冻。
尿液样本应均匀分成离心管,每管1ml,每管加入1/100 (w/v)叠氮化钠,-80℃保存。
样品采集后应立即用液氮冷冻,并运至-80℃保存。
细胞活性应立即终止,以保持细胞的完整性。
一般来说,为了保证有足够的样品来完成整个项目,需要尽可能多的提供单个样品的体积。剩余样品将免费保存一年,并在必要时随时退还。所有样品都需要在-80°C下储存和运输,尽量避免使用表面活性剂(SDS、Triton-X)和无机盐。
单组重复临床样本不少于30例。
单组动物标本重复不少于9例。
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参考文献