粘蛋白类型o聚糖分析服务

优势

• 短时间
• 灵敏度高，检测限制少
• 精度高，重复性好
• 高吞吐量
• 定制的服务

实验过程

邻聚糖修饰分析是识别聚糖结合位点的有效方法。其原理是在天然多糖的各个游离羟基上引入稳定的取代基，然后酸水解分解稳定性比醚弱得多的糖苷键。结果，在先前引入的连接位点上产生了一个带有自由羟基的甲基化单糖。部分甲基化单糖与还原剂(通常是氘化硼)一起打开，引入新的羟基(可能是Cmur1处的氘原子)，这有助于识别单糖的还原端。然后将所有游离羟基乙酰化，形成部分甲基化部分甲基化醋酸糖醇酯(PMAA)，用于后续分析。

服务工作流程

将o -糖蛋白水解得到粘蛋白型的o -糖蛋白，用荧光标记，然后与不同的糖苷酶分步反应。各反应产物经亲水色谱分离，荧光检测器和质谱仪检测。

图2所示。基于质谱的糖蛋白组学在不同复杂生物样品中的典型工作流程。

样品的要求

• 血清/血浆:500μl /样品。

必须避免反复冻融样品。血清标本在室温下在收集管中沉淀30分钟，然后运至离心管，8000转/分离心5分钟。离心后将上清均匀分成500ul /试样的冷冻管。

• 蛋白质:100µg
• 抗凝血(EDTA): 1ml。

采集后必须立即加入抗凝剂和防腐剂，然后在-80°C下冷冻。

• 尿液:1 ml /样品。

尿液样本应均匀分成离心管，每管1ml，每管加入1/100 (w/v)叠氮化钠，-80℃保存。

• 动物组织:200毫克/样品。

样品采集后应立即用液氮冷冻，并运至-80℃保存。

• 细胞数:≥1 × 10⁷/样品。

细胞活性应立即终止，以保持细胞的完整性。

• 粪便:500毫克/样品

一般来说，为了保证有足够的样品来完成整个项目，需要尽可能多的提供单个样品的体积。剩余样品将免费保存一年，并在必要时随时退还。所有样品都需要在-80°C下储存和运输，尽量避免使用表面活性剂(SDS、Triton-X)和无机盐。

单组重复临床样本不少于30例。

单组动物标本重复不少于9例。

报告交付

• 实验程序(中英文)
• 仪器相关参数(中英文)
• 用于鉴别物质的定量或定量信息
• 质谱数据
• 原始数据文件和详细的总结报告

服务周期

• 样品检测:5-10个工作日
• 数据分析:5-10个工作日

创新蛋白质组代谢分析平台致力于为多种靶物质提供全方位、可靠、准确的分析服务，适用于生命科学研究、药物探索、生物学测定等领域。我们真诚希望与您合作，协助您的科研工作。

参考文献

1. Guzman-Aranguez, p . Argueso。眼表粘蛋白型o -聚糖的结构和生物学作用。岩石力学与工程学报，2016,35(1):1 - 8。
2. Brockhausen, H. Schachter, P. Stanley, O-GalNAc Glycans，《糖生物学实质》，nd，等，编辑，冷泉港(纽约)。2009.
3. 陈志强，黄杰，李磊。基于质谱(MS)的复杂生物样品糖蛋白组学研究进展。趋势分析化学，2019,118:880-892。