N-glycan新陈代谢服务

创意蛋白质组是一家领先的生物技术公司，提供可靠、快速、经济的动物糖酵解代谢分析服务。创新蛋白质组学检测平台依托先进的质谱、生化检测平台和经验丰富的科研团队，为广大科研人员提供优质、快速、准确的一站式检测服务。

概述

优势

• 适用于各种各样的化合物分析
• 灵敏度高，检测限制少
• 精度高
• 对难以分离的化合物进行分析

服务工作流程

• 数据采集

HPLC是目前最广泛使用的分析技术。借助高性能液相色谱（HPLC），创造性蛋白质组学鉴定样品并以高效率和精度进行定量分析。

• 定量分析

仪器安装的定量分析软件对数据进行处理，同时得到n -聚糖相对丰度的色谱图。

• 数据统计和报告生成

通过数据分析，生成最终的业务报表。

图2所示。n -糖代谢分析服务的总体流程。

实验过程

• 释放N-聚糖。PNGase F是酰胺酶，其通过切割在N-聚糖，GlcNAC和N-多糖的最内层之间通过切割释放完全双链纯合和杂合的N-多糖。PNGase F的消化时间仅为几分钟，这大大缩短了最新方案中N-多糖的样品制备方法。
• 清理和净化。目的是将多糖与混合物中除去盐和洗涤剂，提高荧光的标记效率。
• 2 ab标签。释放的n -聚糖通常用荧光团标记，以加强聚糖的分离和检测。常用的标记物有2-氨基苯甲酸(2-AB)和2-氨基苯甲酸(2-AA)。
• 标记后纯化。纯化标记的聚糖并除去过量的染料和盐。
• HILIC-HPLC或LC-MS分析。高效液相色谱(HPLC)和液相色谱-质谱(LC-MS)是目前应用最广泛的分析技术，实现了样品的鉴定和高效、准确的定量分析。

样品需求

• 血清/血浆:500μl /样品
• 尿液:1 ml /样品
• 组织：200毫克/样品
• 细胞：≥1×10⁷/样本
• 粪便：500毫克/样品

一般来说，为了确保足够的样本来满足整个项目，需要尽可能多地提供单一样本的体积。剩余的样本将免费存放一年并在必要时随时返回。所有样品都需要储存并在-80°C下运输。

单组重复临床样本不少于30例。

单组动物标本重复不少于9例。

样品预处理

去污剂、无机盐、缓冲成分和磷脂属于复杂样品，会影响仪器的精度。

为减少干扰，样品需进行如下预处理(以血清为例):待测血清样品在4℃解冻后进行分析。将血清与甲醇按1:2的比例混合，-20℃保存2小时，4℃13000 rpm离心15分钟。上清液与50%甲醇同体积混合，4℃13000rpm离心15 min, 0.22 μm滤器过滤。

报告交货

• 实验程序（中英文）
• 仪器相关参数(中英文)
• 用于鉴别物质的定量或定量信息
• 质谱数据
• 原始数据文件和详细的摘要报告

服务周期

• 样品检测:5-10个工作日
• 数据分析：5-10个工作日

创意蛋白质组学代谢分析平台致力于各种目标物质的全面，可靠和准确的分析服务，适用于生命科学研究，药物勘探，生物学确定等领域。我们提供个性化的新陈代谢分析服务来支持您的科学研究。

参考资料

1. Dobrica, m . O。等．（2020）。“N-糖基化和HBV生物学和发病机制中的N-聚糖加工。”细胞9(6)。
2. Gornik，O.，等．(2012)．替代糖基化调节IgG和其他蛋白质的功能——对进化和疾病的影响。Biochim Biophys学报1820（9）：1318-1326。
3. Keser，T.，等．(2018)。2-氨基苯甲酰胺、普鲁卡因酰胺和快速荧光质谱作为衍生试剂用于高通量HILIC-UPLC-FLR-MS n -聚糖分析的比较前化学6: 324。
4. 杨，X.，等．(2018)。黄蜂蜇伤患者的血清代谢组学分析生物医学Res Int2018：5631372。