糖基磷脂酰肌醇锚分析服务

在ER内，酰基转移酶GWT1加入酰基链，其主要是棕榈酸酯，在GLCN-PI中的肌醇的2-位，产生GLCN-（酰基）PI。随后，MAN1和MAN2分别通过GPI甘露糖基 - 转移酶1（GPI14）和GPI甘露糖基转移酶2（GPI18）从多硅膦酮（DOL-POM）转移到GLCN-（酰基）PI。此外，通过EtN-P转移酶（MCD4）将EtN-P从磷脂酰乙醇胺（PE）转移至MAN1。然后，通过GPI甘露糖基 - 转移酶3（GPI10）将MAN 3添加到MAN2中，并且将MAN4通过SMP3加入MAN3，以将ETN-P添加到MAN3之前通过ETN-P转移酶3加入MAN3。。该复合物含有GPI13作为催化亚基和稳定亚单位GPI11。最后，通过加入EtN-P转移酶2加入EtN-P，其由催化亚单位GPI7和稳定亚单位GPI11组成。

好处

• 短暂耗时
• 高灵敏度和少数检测限制
• 高精度和良好的重复性
• 高吞吐量
• 定制服务

服务工作流程

脂筏在GPI-AP的胆固醇，鞘脂，跨膜蛋白，和脂化蛋白质丰富微小区域。GPI锚的磷脂是GPI-AP的疏水性是至关重要的。通过与磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C（PI-PLC）或磷脂酶d（PLD）处理，GPI锚可在磷酸盐和脂质之间裂解。当的Triton X-114进行温度诱导相分离，通过PI-PLC或PLD裂解GPI-AP的亲水性形式中发现水相。GPI-APS，PI-PLC和PLD从拟南芥中分离拟南芥治疗人类脂筏相关蛋白。这种方法能够有效地表明GPI-AP和使用质谱法的存在来识别ω-网站。

根据LC-MS / MS分析GPI的图2的工作流程。

样本要求

• 血清/血浆：500μl/样品

必须避免反复冻结和解冻样品。在室温下血清样品在收集管中沉淀30分钟，然后将其运输到离心管，并以​​8000rpm离心5分钟。离心后，将上清液同等分为500μl/样品的冷冻管。

• 蛋白质：100μg
• 抗凝血液（EDTA）：1毫升

在收集后必须立即添加抗凝血剂和防腐剂，然后在-80°C下冷冻。

• 尿液：1毫升/样品

尿液样品应同等分为每管1mL的离心管，每根管加入1/100（w / v）叠氮化钠并储存在-80℃。

• 动物组织：200毫克/样品

应立即在液氮中冷冻样品，然后在收集后运输至-80℃以进行储存。

• 细胞：≥1×10^7./样本

Cytoactive应该立即终止以维持细胞完整性。

• 粪便：500毫克/样品

一般来说，为了确保足够的样本来满足整个项目，需要尽可能多地提供单一样本的体积。剩余的样本将免费存放一年并在必要时随时返回。所有样品都需要在-80°C下储存和运输，并尝试使用表面活性剂（SDS，Triton-X）和无机盐。

在单个组中不少于30例重复临床样品。

动物样品在单个组中不少于9例。

报告交货

• 实验程序（中英文）
• 装置的相关参数（中英文）
• 用于鉴定物质的定量或定量信息
• 质谱数据
• 原始数据文件和详细的摘要报告

服务周期

• 样品测试：5-10个工作日
• 数据分析：5-10个工作日

创意蛋白质组学代谢分析平台致力于各种目标物质的全息，可靠和准确的分析服务，适用于生命科学研究，药物勘探，生物学测定等领域。我们真诚希望与您合作，助致您的科学研究。

参考

1. W. Wang，L. Shi，Y.Qin，等。硫酸软骨素/皮肤硫酸盐降解酶的研究与应用。前电池DEV BIOL，2020,8：560442。
2. Z. Wang，K. Arnold，Y.Xu，等。同位素标记的校准剂的硫酸乙酰肝素的定量分析。Commence Biol，2020,3（1）：425。