代谢组学创造性的蛋白质组学

创造性的蛋白质组学代谢组学

各种类型的n -聚糖分析服务

各种类型的n -聚糖分析服务

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创造性的蛋白质组学,作为一个领先的生物技术公司,提供了在动物各种类型N-聚糖分析服务的,包括高甘露糖,杂合和复杂的N-聚糖代谢分析服务。依托先进的质谱和经验丰富的科研队伍,创新蛋白质组学测试平台提供优质,快速,准确的一站式测试服务,以支持您的科研。

概述

N-聚糖的合成需要的脂质连接的寡糖前体,其被运送到新的蛋白质的内质网的形成,和N-聚糖被链接到ASN天冬酰胺在共同序列ASN-X-丝氨酸/苏氨酸。所有真核生物生产N-聚糖和保留在该polyterpenoid醇寡糖前体的合成和内质网中的顺序处理反应的第一步。

n -聚糖的多样性,即高尔基体中的高甘露糖n -聚糖可以转化为各种杂交和复杂的n -聚糖亚型,这是由于脊椎动物基因组编码的酶的存在,包括内质网和高尔基体中存在的糖基转移酶和糖苷酶。这些酶具有显著的底物特异性和独特的表达模式,因此在某些类型的细胞中n -聚糖的结构发生了变化。

动物体内各种类型的n -聚糖生物合成及识别图1所示。动物体内各种类型的n -聚糖生物合成和n -聚糖识别(Tivey et al., 2020)。

优势

  • N-聚糖的高覆盖
  • 灵敏度高,检测限制少
  • 精度高,重复性好
  • 对难以分离的化合物进行分析

实验过程

创造性蛋白质组学提供各种类型的n -聚糖分析,以识别连锁位点,监测特定聚糖类型和确定特定聚糖组的相对含量。

  • 样品制备
  • 我们按照以下要求提供样品

  • N-glycan释放
  • 聚糖通过酶消化释放,诸如PNG酶女,从而各种类型的N-聚糖的释放并进行排序。

  • 多糖纯化
  • 各种类型的n -聚糖在标记前被提纯以去除干扰物质。

  • 发布甲基化的N-聚糖
  • 一个甲基被引入到每个游离羟基上。

  • 用糖苷外切酶或酸水解裂解糖
  • 糖苷键的裂解,从而产生部分地甲基化的单糖。

  • 减少和衍生化
  • 甲基化单糖是开环和标记的。

  • 采用HPLC或LC-MS分析和定量
  • 的释放检测由装置的N-聚糖。

服务工作流程

从蛋白质中释放的酶促n -聚糖的示意图和释放聚糖的表征工作流程图2所示。从蛋白质中释放的酶解n -聚糖的原理图和释放聚糖的表征工作流程(Dallas, Lee, Parc, de Moura Bell, & Barile, 2013)。

样品的要求

  • 血清/血浆:500微升/样品。
  • 必须避免反复冻融样品。血清标本在室温下在收集管中沉淀30分钟,然后运至离心管,8000转/分离心5分钟。离心后将上清均匀分成500ul /试样的冷冻管。

  • 蛋白质:100µg
  • 抗凝血(EDTA): 1ml。
  • 在收集后必须立即添加抗凝血剂和防腐剂,然后在-80°C下冷冻。

  • 尿:1毫升/样品。
  • 尿液样品应同等分为每管1mL的离心管,每根管加入1/100(w / v)叠氮化钠并储存在-80℃。

  • 动物组织:200毫克/样品。
  • 应立即在液氮中冷冻样品,然后在收集后运输至-80℃以进行储存。

  • 细胞数:≥1 × 107/样本。
  • 细胞活性应立即终止,以保持细胞的完整性。

  • 粪便:500毫克/样品

一般来说,为了保证有足够的样品来完成整个项目,需要尽可能多的提供单个样品的体积。剩余样品将免费保存一年,并在必要时随时退还。所有样品需要在80°C下储存和运输。

单组重复临床样本不少于30例。

单组动物标本重复不少于9例。

报告交付

  • 实验程序(中英文)
  • 仪器相关参数(中英文)
  • 用于鉴别物质的定量或定量信息
  • 质谱数据
  • 原始数据文件和详细的摘要报告

服务周期

  • 样品检测:5-10个工作日
  • 数据分析:5-10个工作日

创新蛋白质组代谢分析平台致力于为多种靶物质提供全方位、可靠、准确的分析服务,适用于生命科学研究、药物探索、生物学测定等领域。我们真诚希望与您合作,协助您的科研工作。

参考

  1. 达拉斯,D.C.,李,H.,公园,A. L.,德莫拉贝尔,J.M.,&Barile,D.(2013)。耦合质谱为基础与Bioguided处理“组学”科学揭开牛奶的隐藏生物活性。Ĵ进阶乳业RES,1(2),104。DOI:10.4172 / 2329-888X.1000104。
  2. Mereiter, S., Balmana, M., Gomes, J., Magalhaes, A., & Reis, C.(2016)。胃肠道肿瘤中发现靶点的糖分子方法。Front Oncol, 6,55。doi: 10.3389 / fonc.2016.00055。
  3. Tivey,T. R.,帕金森,J.E.,Mandelare,P. E.,Adpressa,D. A.,彭,W.,董,Loesgen,S。(2020)。N-连接的聚糖的表面的生物合成,组成,抑制,和作用在刺胞-甲藻共生。微型B ECOL,80(1),223-236。DOI:10.1007 / s00248-020-01487-9。

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