儿茶酚胺是含有儿茶酚和胺基的物质,在大脑和神经信号传递中起重要作用,与人类健康和帕金森病等神经和精神疾病密切相关。儿茶酚胺主要包括肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素、肾上腺素、多巴胺及其衍生物。这些物质不仅是体内重要的神经递质,也是重要的激素,与多种生理病理现象密切相关。与此相关的是,它在维持身体的内稳态平衡中起着关键作用。生物样品中儿茶酚胺含量低,基质复杂,自身荧光或质谱检测的响应信号不强,同位素衍生化后的样品可具有灵敏度高、选择性好、抗基质干扰能力强,在LC-MS/MS中具有多组分同时检测的特点,具有高通量、准确测定的特点。我们用d0/ d3.-10-甲基吖啶酮-2-磺酰氯0/ d3.-MASC)作为同位素编码衍生化试剂,结合超声辅助分散液液微萃取技术和UPLC-MS/MS快速分析方法测定儿茶酚胺。我们也可以用LC-MS进行瓜氨酸的含量分析,为瓜氨酸的检测提供了较高的灵敏度。
图1所示。儿茶酚胺自毒性理论综述。戈尔茨坦(2018)。
采用d0-MASC和d3-MASC分别导出微量分析液样和对照品,采用分散液-液微萃取技术富集纯化混合物,然后采用UPLC-MS/MS检测,并以衍生物的内标物定量。样品可以快速分离和检测,具有良好的峰形和分辨率。LC-MS用于痕量样品物质的检测、定量分析结果。
图2。儿茶酚胺分析服务流程。
检测方法:标准曲线法,同位素编码推导
流动相:A为甲醇,B为0.1%(体积分数)甲酸水
梯度洗脱条件:0-2分钟:50%-90%A;2-3分钟:90%-100%A;3-5分钟:100%-50% A
注入体积:5μl
流量:0.5毫升/分钟
洗脱模式:梯度洗脱
分析时间:3分钟
检出限:0.005 - 0.010 nmol / l
相关系数:≥0.995
定量下限:0.018 - -0.040 nmol / l
反应离子:正离子电喷雾电离
监控模式:三重四极杆质谱多反应监测模式
毛细管电压:3.0 kV
脱溶气体(氮气)流量:800升/小时
锥形气体(氮气)流量:50 l / h
碰撞气体(氦)流量:0.16毫升/分钟
保留时间:≤0.6 min
标准偏差:3.7%
平均矩阵效应:99.3%
多巴胺 | 去甲肾上腺素 | 肾上腺素 |
临床样本,单组不少于30份;动物样本,单组不少于9个重复;细胞和微生物样品,单组不少于5份;其他如植物样品,不少于7个重复,在单组重复。
样品包括动物、植物、微生物等多种样品类型,详情请与我们联系。
采用同位素编码衍生化-分散液液微萃取/UPLC-MS/MS和LC-MS方法实现儿茶酚胺的分析应用。该方法具有良好的灵敏度和抗基质干扰能力,检测准确、快速、特异、有效。多种样品类型中儿茶酚胺的含量可为相关医学检验和药物筛选提供良好的技术手段。创新蛋白质组学致力于为您提供更具竞争力的分析成本和快速的分析技术方法,满足您的高通量、高灵敏度检测需求。
参考文献
版权所有©2023 Creative Proteomics版权所有。