蛋氨酸是维持人和动物正常发育所必需的氨基酸之一。在饲料行业、医药行业、保健行业、食品行业有着广泛的应用。其中,饲料添加剂用量最大。l -蛋氨酸是蛋氨酸的l体,也是蛋白质生物合成的“骨架”氨基酸。它是动物体内甲基的主要供体。它通常用于配制复杂的氨基酸输液,以及生化研究和营养补充剂。该方法结合了荧光检测的灵敏度和紫外检测的便捷性。对于需要在不具备荧光检测条件的情况下快速测定生物样品中蛋氨酸含量的科研实验,该方法可作为参考。同时实验证明,该方法的稳定性和重复性都很好,不受杂质氨基酸的干扰。
图1所示。强化l -蛋氨酸生产的重组大肠杆菌的构建(Tang 2020)。
我们的操作技术是采用眼甲醛柱前衍生法。衍生化试剂邻苯二醛衍生化样品后,衍生化试剂本身无紫外线吸收,不形成干涉峰。它与巯基丙酸相容。与初级氨基酸联合使用时反应迅速,2分钟即可完成,衍生物的峰形和峰时间都很稳定。
图2。l -蛋氨酸分析服务流程。
检测方法:眼甲醛柱前衍生法
高峰时间:7.5 8分钟
流动阶段A:pH 7.2 10mmol /L Na2HPO4- NaH2PO4 (PB),含0.2% THF
移动阶段B:PB-methanol-acetonitrile (50:35:15)
紫外检测波长:340海里
流量:1毫升/分钟
内部参考解决方案:超纯水或10 μ mol/L蛋氨酸标准溶液
衍生化反应时间:2分钟
注入体积:50 ul
氨基酸洗脱时间:12分钟
定量极限:0.5 umol / l
线性相关系数:0.9994 - 1
1.样品不需要其他污染,也不需要沉淀物。
2.一般非纯粉末样品提供10g左右,液体样品提供10ml以上。
3.如果是难以纯化的样品,则需要大于200ug /ml,体积不小于5ml,固体质量不小于400ug。测量的样品不退,请保留备份。
基于质谱法的眼甲醛柱前衍生结合高效液相色谱紫外检测,可对生物样品中的l -蛋氨酸进行检测和定量分析,并可为客户提供快速可靠的分析报告。Creative Proteomics拥有具有竞争力的技术手段和经验丰富的分析工程师团队。我们致力于与您合作,协助您完成和推进科研任务。
参考文献
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