二维凝胶电泳，简称2-DE，是利用凝胶电泳分析蛋白质混合物的一种功能强大且应用广泛的工具。虽然等电聚焦和SDS-PAGE都是强大的技术，但二维电泳是两种方法的巧妙结合。蛋白质首先通过等电聚焦的等电点(pl)分离，然后通过SDS-PAGE分离，根据分子量分解蛋白质。二维电泳上的每个蛋白点都可以通过高通量质谱进行洗脱和鉴定。因此，二维电泳对于比较不同组织、条件或对照和处理样品之间的蛋白质谱特别有用。

2D电泳服务概述

在创意蛋白质组，我们可以根据标准操作程序(sop)提供可靠的2D电泳服务。有了这项服务，由数千种不同蛋白质组成的复杂混合物可以被分离，然后可以确定它们的相对数量。

图1所示。二维电泳流程。

• 样品制备。样品需要转化为物理化学状态，样品制备的步骤取决于样品的类型。
• 等电聚焦首次分离．在pH梯度凝胶的碱性末端装载蛋白质混合物。施加电场后，带正电荷的蛋白质会向阴极迁移，带负电荷的蛋白质会向阳极迁移。
• 通过SDS-PAGE进行二维分离．该方法一般包括凝胶制备、固定化pH梯度条带在SDS缓冲液中的平衡和电泳三个步骤。
• 可视化的结果．我们使用多种方法(如蓝染色和银染色)可视化蛋白质。
• 进一步分析。可分离蛋白质，并可测定分子量、pl、量等信息。

样品的要求

我们接受不同的样品，包括但不限于

• 纯化蛋白质
• 冷冻的细胞颗粒或组织
• 细胞(如血细胞)或组织
• 血清/血浆/尿液
• 细胞培养
• 发酵培养
• 微生物
• 植物

二维电泳的优点

• 高通量．二维电泳可以在一次运行中准确分析数千种蛋白质。
• 高分辨率．该技术根据pI和分子质量来解析蛋白质，并使蛋白质具有影响其电荷状态的翻译后修饰特征。
• 各种基于计算机的工具是可用的．我们有像samespot, Delta2D, ImageMaster这样的工具，可以用来检测和定量蛋白质斑点。
• 有成本效益的和负担得起的．质谱仪是一项重大投资，需要有经验的工作人员，而二维电泳相对便宜。
• 灵活性．我们与您紧密合作，设计最优的实验方案，以满足您的研究目标的预算。

二维电泳的应用

• 蛋白质的分类
• 蛋白质种类及异构体分布分析
• 蛋白定量
• 转译后的改性研究
• 蛋白质和抗体的质量控制
• 宿主细胞蛋白分析
• 下游分析，如western blotting
• 发育遗传学、疾病病因学、生物标志物和靶标发现

基于专业知识和经验丰富的员工，Creative Proteomics为蛋白质分析提供高分辨率、高通量的2-DE服务。这项服务可以提供蛋白质谱变化和翻译后修饰的直接可视化。它还有助于生物标记物的发现和检测，以及药物的发现。由于每个项目都有不同的需求，请联系我们的专家讨论您的具体需求。