脱氧核苷酸三磷酸（DNTPS）是含有脱氧的核苷三磷酸酯。它们是DNA的结构块，当复制过程中掺入DNA时，它们丢失了两种磷酸盐基团。DNTPS的成员包括脱氧腺苷三磷酸（DATP），脱氧三磷酸三磷酸（DTTP），脱氧胞苷三磷酸（DCTP），脱氧核苷酸三磷酸（DGTP）和三磷酸脱氧尿苷（DUTP）。

除了DATP，DTTP，DCTP，DGTP和DUTP等丰富DNTP之外，还可提供一些不那么丰富的NTP，例如互变异构形式的一些DNTP或人工核苷酸。在DNA复制期间，DNTPS的互变异构形式可能导致不匹配。一个例子是胞孔的胞间构形式能够与腺嘌呤形成3个氢键并导致不匹配。另一个例子是，在真核生物中通常遇到的5-甲基胞嘧啶的序列将导致胸腺嘧啶。那些错配不是没有被修复的。DNA聚合酶III的3'至5'外切核酸酶活性将在复制过程中消除错配的碱并催化添加的正确DNTPS。

DNA复制和修复需要4种脱氧核糖核酸三磷酸（DNTPS），DATP，DTTP，DCTP，DGTP。这4个脱氧核糖核苷三磷酸的微妙平衡对于正确的DNA合成是重要的。在真核细胞中存在的四个脱氧核糖核苷核苷三磷酸（DNTPS）是几分钟的，足以仅为几分钟的DNA复制。单一DNTP的缺乏或剩余可能导致DNA复制中的突变率增加。用于DNA聚合酶的底物，DNTPS在细胞的量受到限制，因为核糖核苷酸还原酶（RNR），催化从核糖核苷酸转化为脱氧核苷酸的酶，仅当细胞进入S期时才能激活。在52年前发现的RNR催化来自四个相应的核糖核苷酸二磷酸（RNDPS）的形成脱氧核苷类磷酸酯（DNDP）。DNDP又迅速转换为DNTPS。在非环细胞中的RNR水平和活性相当低，并且在细胞分裂循环的G1相期间，当细胞进入细胞分裂周期的S期或在DNA修复期间，在显着增加。实际上，RNR是众所周知的酶最受控制的一种。在哺乳动物中，该酶是通过DATP，DTTP和DGTP激活的，并通过DATP反馈抑制。 Other regulation factors include specific inhibitory proteins in yeasts, by cell cycle-dependent transcription of the genes and by RNR subunit protein stability.

真核细胞中的四个DNTPS处于相当低的浓度，并且在细胞周期的不同时期经历大的变化。当细胞停止循环时，DNTP池的大小缩小，并且在细胞复制期间对应于尺寸的小于10％，达到每百万个细胞1pmol。因此，在遗传造成细胞和人类疾病的动物模型中检测DNTP池中的有限DNTPS的敏感和可靠的定量方法，以检测遗传手段中的DNTP池中的变化，并了解核和线粒体DNA复制和修复诱变和凋亡的机制。通常，细胞提取物中的DNTP通过两种独立方法量化：高性能液相色谱（HPLC）和具有DNA聚合酶的酶测定。理想情况下，最好结合这两种方法，因为任一方法都有其缺点。引入了高敏感的LC-MS / MS方法以进行量化dntps和cyclic-di-amp最近。

平台

• UPLC-MRM / MS

概括

• 通过UPLC-MRM / MS鉴定和定量脱氧核苷酸三磷酸三磷酸酯（DNTPS）和环状二极管的定量。

样本要求

• 正常体积：200ul血清/等离子体;200毫克组织，2E7细胞
• 最小的体积：50ul血清/等离子体;50毫克组织，5E6细胞

报告

• 将在整个项目结束时提供详细的技术报告，包括实验程序，MS / MS仪表参数。
• 分析物报告为UM或UG / MG（组织），CV通常为<10％。
• 报告中也将包含分析物，缩写，公式，分子量和CAS＃的分析物的名称。

在这项服务中量化的脱氧核苷酸三磷酸（DNTPS）和环状二柱状

通过集成的分离，表征，识别和量化系统，具有出色的鲁棒性和再现性，高和超灵敏度，创意蛋白质组学提供可靠，快速和成本效益脱氧核苷酸三磷酸（DNTPS）和环状DI-AMP有针对性的代谢组服务。