异前列腺素是新近发现的一类化合物,是多不饱和脂肪酸在体内非酶氧化的结果。自由基催化花生四烯酸过氧化产生异前列腺素,称为F2-isoP是Mihelich最先引入的。异前列腺素的发现具有重要的医学依据。他们发生了最可预测的氧化应激的标记,而在生物样品浓度的测量是最推荐体内氧化还原状态的评估方法,提供了一个重要的工具来探索氧化过程的作用在人类疾病的发病机制。F的升高2-isoP在许多与活性氧丰度增加有关的情况下都被观察到,如哮喘、神经退行性疾病(亨廷顿病、阿尔茨海默病或多发性硬化)、酒精性和非酒精性肝病、肺病或糖尿病。
图1异前列腺素的生物学功能。
除了F2-isoP,在体内还存在其他类型的异前列腺素,包括F3.-isoP由二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)非酶氧化的结构最多样化的产物形成。EPA和dha衍生的异前列腺素似乎有多种生物学作用,所以F2-isoP仍然是氧化应激的主要指标。
异前列腺素通常通过成熟的气相色谱-质谱法(GC-MS)和酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆或尿液中的异前列腺素。即使气相色谱-质谱方法是敏感的,由于分离之前需要衍生化步骤,所以过程通常是冗长和耗时的。通常,异前列腺素通过五氟苄基溴化处理转化为五氟苯基酯。商品化ELISA的主要缺点是可以观察到交联反应,每个试剂盒只能测量F的一个异构体2-isoprostanes。然而,当生物分子分析中出现灵敏度和选择性问题时,在各种色谱方法中,液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)是解决这些问题的最佳方法。
LC-MS/MS方法具有较高的灵敏度、选择性和较短的运行时间,尤其适用于血浆中含有大量共洗脱干扰的样品。液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)是一种有效的方法2-isoprostanes。此外,为了在极低浓度下实现精确定量,还可以使用非放射性同位素标记标准品来补偿样品制备过程中分析物的损失,这是消除生物标志物分析中基质效应的最重要步骤。在创新蛋白质组学经验丰富的科学家的帮助下,我们开发了一种可靠的、可重复的方法,使用高灵敏度的LC-MS/MS方法快速识别和定量不同样品类型中的不同异前列腺素,可以满足您实验室学术和工业研究的需要。
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