甲戊酸途径又称HMG-CoA还原酶途径或类异戊二烯途径，是真核生物、古生菌和某些细菌必不可少的重要代谢途径。甲戊酸途径被广泛研究。众所周知，这一途径与心血管疾病有关。近年来，大量的实验和临床研究表明，抑制非固醇类异戊二烯具有重要的治疗意义。通过合成固醇类异戊二烯，如胆固醇和非固醇类异戊二烯，这一途径在各种细胞过程中发挥重要作用。从乙酰辅酶a开始，甲戊酸途径以两个五碳结构块结束，即异戊烯基焦磷酸(IPP)和二甲基焦磷酸烯丙基焦磷酸(DMAPP)，它们用于制造胆固醇、辅酶Q10和所有类固醇激素等类异戊二烯。这一途径，特别是甲戊酸途径中的HMG-CoA还原酶，是一类降胆固醇药物他汀类的众所周知的靶点。他汀类药物可抑制HMG-CoA还原酶的活性，从而抑制胆固醇类异戊二烯的生成。

甲戊酸途径始于两个连续的酶催化步骤从三个乙酰辅酶转化为3-羟基-3-甲基戊二醇辅酶a (HMG-CoA)。该途径的限速酶，HMG-CoA还原酶将HMG-CoA转化为甲戊酸(MVA)。MVA经过两次磷酸化后生成5-焦磷酸evalonate (MVAPP)。MVAPP的脱羧作用形成IPP。

甲戊酸途径在细胞代谢中起着关键作用，它负责将乙酰辅酶a转化为5-二磷酸异戊烯基，这是各种聚异戊二烯类代谢产物和天然产物的前体。这些类聚异戊二烯代谢物和天然产物具有许多不同的功能。该途径除产生各种甾醇用于合成激素、胆汁酸和氧甾醇外，还产生了由异戊烯基焦磷酸(IPP)和二甲基焦磷酸烯丙基(DMAPP)衍生的结构和功能多样的非甾醇类异戊二烯。血红素A作用于线粒体呼吸链，泛素-10侧链，参与蛋白质翻译的异戊烯基trna，蛋白质糖基化所必需的二醇，是非固醇类异戊二烯。这些非固醇类异戊二烯是许多疾病的潜在治疗靶点，如肿瘤、自身免疫性疾病和阿尔茨海默病。

在文献中，已经描述了大量涉及甲戊酸途径中间体的检测方法。然而，在上述大多数方法中，只有一种中间体可以测定，如人尿和血浆中的MVA和植物叶片中的DMAPP。虽然已经描述了同时测定大鼠肝脏和培养NIH3T3细胞中FPP和GGPP，但同时测定甲戊酸通路中所有中间体仍然是一个挑战。这是因为甲戊酸途径中涉及的中间体在结构和物理性质上有很大的不同。McCaskill和Croteau描述了一种同步放射性标记定量方法，用于分析植物细胞中甲戊酸途径的所有11个中间体。

在不使用放射性或荧光化合物的情况下，Creative Proteomics开发了一种灵敏的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法，用于直接检测和定量甲戊酸途径中的所有中间体。

平台

• UPLC-MRM /女士

总结

• 细胞或组织中甲戊酸途径的混合有机溶剂萃取中间体的鉴定和定量。

样品的要求

• 正常体积:200ul血清/血浆;200mg组织，2e7细胞
• 最小体积:50ul血清/血浆;50毫克组织，5e6细胞

报告

• 在整个项目的最后会提供一份详细的技术报告，包括实验过程，MS/MS仪器参数。
• 分析物报告为uM或ug/mg(组织)，CV通常<10%。
• 分析物的名称、缩写、分子式、分子量和CAS号也将包括在报告中。

创新蛋白质组具有一套完整的分离、表征、鉴定和定量系统，具有良好的稳健性和重现性，高灵敏度和超灵敏度，提供可靠、快速和经济的甲戊酸途径靶向代谢组学服务。