介绍
蛋白质是两性分子,其含有酸性和碱性氨基酸。构成蛋白质的氨基酸可以是阳性,阴性或中性的,这取决于环境pH,因此给予蛋白质的总电荷。等电点(PI)是特定分子没有净电荷的pH。因为特定突变,截断或翻译后修饰可以改变天然蛋白的PI。分子上的净电荷通过其自身的Pi和周围环境的pH影响,并且由于分别是质子(H +)的增益或损失,蛋白质可以变得更积极或充电。在p p pi以下,蛋白质携带净正电荷;在他们的PI之上,他们携带净负电荷;等于它们的PI,蛋白质没有净电荷,因此在电场中不会进一步迁移。
可以通过等电聚焦(IEF)检测蛋白质的等电点。当蛋白质向极点移动到电荷相反时,它们在pH梯度方面固定,因为它们接近其特定的pi。结果,蛋白质聚焦聚焦成尖锐的固定条带,每个蛋白质位于对应于其PI的pH梯度的点。在IEF中,蛋白质只能通过单一充电的不同区分分离成单独的频段,使该技术极高分辨率。
毛细管等电聚焦技术
毛细管等电聚焦允许基于等电点(pI)分离蛋白质/肽混合物、蛋白糖型和其他带电变体。在阳极液和阴极液槽上施加电压,通过毛细管建立pH梯度。应用于该领域的蛋白质可以根据它们的净电荷被分离,当它们达到pH值(等于它们的pI)时就被固定。
与凝胶中的常规等电聚焦(IEF)相比,CIEF允许更高的分辨率,更快的样品分析,具有10倍的检测限。更重要的是,CIFIE允许实时观察和消除常规等电聚焦中冗长的动员阶段期间的样品劣化。
在创造性蛋白质组学中,采用毛细管等电聚焦技术(cIEF)进行pI的测定,该技术具有较高的分辨率和准确度,重现性和高通量;离子交换色谱可以根据蛋白质分子的净电荷分离蛋白质分子,用于监测蛋白质治疗的电荷变化,评估不同批次之间的可比性。
毛细管等电聚焦(CIEF)是一种高分辨率的分析技术。我们的毛细管电泳服务允许您快速准确地确定蛋白质的等电点。
PI测定的应用:
我们的分析服务提供:
排序过程: