蛋白质鉴定服务
质谱技术支持蛋白质和多肽的鉴定,不需要费时的凝胶制备的繁琐工作。Creative Proteomics一直致力于优化我们的质谱技术平台。我们开发了一个完整的蛋白质鉴定流水线,从样品制备、蛋白质分离纯化、质谱分析到系统的生物信息学分析。
下图展示了使用MS/MS方法进行蛋白质鉴定和表征的典型工作流程。起点是给定的蛋白质样本,可能是单一蛋白质,也可能是不同蛋白质的复杂混合物。一种酶,通常是胰蛋白酶,用来把蛋白质消化成缩氨酸。在大多数情况下,色谱的一个或多个阶段被用于调节肽进入质谱仪的流动。然后在质量分析的第一阶段,每次选择一个多肽。在质谱分析的第二阶段,每个分离的肽被碰撞诱导成片段。这些碎片被捕获来合成质谱/质谱。

凭借多年先进的实验设备经验,Creative Proteomics可以为您提供多种蛋白质组学服务,以协助您的科研工作,包括:
作为领先的组学分析服务提供商之一,Creative Proteomics为我们的客户提供一系列的蛋白质鉴定服务。我们的服务保证准确可靠的结果,在快速的周转时间!请随时与我们联系,看看我们如何帮助解决您的问题。
+常见问题解答
- 什么类型的样本可以被分析?
任何含有蛋白质和多肽的样品都可以被分析,然而,所使用的方法将取决于样品的类型和所需的结果。
创造性蛋白质组学提供蛋白质和多肽及其翻译后修饰的分析。
- 如何为质谱分析准备样品?
蛋白质必须是凝胶带或冻干的。PVDF膜上的蛋白质不能用质谱分析。斑点或条带应染色(例如用考马西或MS兼容的银染色),然后剪掉。凝胶片应在微离心管中风干。这种蛋白质相对稳定,可以通过邮寄/快递发送。样品是纯的,并且在低盐缓冲液中,如50mM碳酸氢铵;对于TRIS或磷酸盐缓冲液,最大盐强度为20mM。氯化钠和表面活性剂(如SDS)不能存在。样品必须在运输前在微离心管中冷冻干燥或冻干。
注:样品表上必须注明缓冲液的类型和干燥前液体的体积。必须小心避免污染物污染凝胶。
- 质谱法如何鉴定蛋白质?
蛋白质被胰蛋白酶消化成多肽,然后每个多肽被电离并在质谱仪中单独分析。这个过程通过切断氨基酸来片段每个肽段,然后使用吉祥物搜索算法将片段谱与数据库进行比较,以寻找相同的氨基酸序列。
这个过程可以识别已知的蛋白质,或密切相关的蛋白质。
注意:对于无法识别的样品!自动数据库分析是指从头测序。
- 质谱蛋白鉴定。
质谱法是获取蛋白质序列信息的最新技术,因为它既快速又经济。
1 .蛋白鉴定方法:采用MALDI-TOF/TOF (PMF+MS/MS)质谱法进行蛋白鉴定。
为了鉴定1或2个低丰度蛋白,使用:电喷雾LC/MS/MS质谱法进行蛋白鉴定。
使用Proteome mapping (MuDPIT) 1D LC-MALDI鉴定10个(到>100)蛋白。
使用Proteome mapping (MuDPIT) 2D LC-MALDI鉴定100个(到>1000)蛋白。
比较两个(或更多)含有100s(到>1000)蛋白质的样品使用
通过iTRAQ分析(这提供了同时鉴定和定量的蛋白质)。
- 我应该选择MALDI TOF/TOF还是LC-MS/MS?
如果条带为考马斯西染色,使用质谱法进行蛋白鉴定(MS/MS测序),并选择MALDI-TOF/TOF (PMF+MS/MS)质谱法进行自动数据库分析。这是最快、最经济的方法,也是考马斯氏染色凝胶和2D凝胶斑点的最佳方法。
如果条带是银染的或可能包含多种蛋白质使用:蛋白质鉴定通过质谱(测序通过MS/MS)和选择电喷雾(LC/MS/MS)质谱与自动数据库分析。这是最灵敏的方法。
- 知道要搜索哪个基因组数据库很重要吗?
蛋白质鉴定是通过将肽片段模式与公共数据库中的序列进行匹配来实现的。这是理想的人类,老鼠,水稻,拟南芥,水果等。如果样本来自与已知基因组高度相似的生物体,那么就会得到好的结果。
*只供研究用途。不用于诊断程序。
我们的客户服务代表每周7天,每天24小时都有服务。
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