蛋白质是重要的大分子,在细胞和系统水平上促进各种生物过程。巨大的分子过程通过蛋白质相互作用(PPI)组织的大量蛋白质组分进行调节,PPI指的是两个或多个蛋白质之间建立的有意物理接触,并导致特定的生化事件。这种相互作用是整个活细胞相互作用组学系统的核心,毫不奇怪,特定的PPI与多种疾病相关。

图1。蛋白质相互作用热点和变构位点。(特恩布尔A P。等.; 2014)
蛋白质相互作用的发现和验证是理解这些蛋白质在何处、如何以及在何种条件下相互作用的第一步体外/体内以及相互作用背后的功能含义。如表1所示,PPI研究中的一些常用方法如下所示。
表1。PPI研究中最流行的方法
| 方法 | 生产者价格指数的类型 |
|---|---|
| 共免疫沉淀(Co-IP) | 稳定还是强壮 |
| 下拉分析 | 稳定还是强壮 |
| 交联蛋白质相互作用分析 | 短暂的或微弱的 |
| 标记转移蛋白相互作用分析 | 短暂的或微弱的 |
| 远蛋白印迹分析 | 中等稳定 |
创造性蛋白质组学中的蛋白质相互作用分析
我们小组采用了各种技术来研究PPI。每种方法都有自己的优点和局限性。我们为客户提供最合适的方法。我们的服务包括但不限于:
Co-IP是一种有用的方法体外方法评估参与复合物的蛋白质,以及复合物是否紧密结合。PPIs鉴定利用靶蛋白特异性抗体捕获与特定靶蛋白结合的蛋白质。Co-IP不仅可以捕获和纯化主要目标,还可以捕获和纯化参与相互作用的其他大分子。
下拉分析能够检测两种或多种蛋白质之间的物理相互作用,并识别先前未知的PPI。在下拉试验中,将诱饵蛋白标记并固定在亲和树脂上。当样本与诱饵蛋白一起孵化时,与诱饵蛋白结合的蛋白质将被捕获并“拉下”。
交联蛋白质相互作用分析适用于可执行的瞬时或弱相互作用体内或体外. 在该方法中,分析溶液,如交联试剂或交联剂,能够通过共价结合阻止蛋白质-蛋白质复合物,相应地随后进行分离和表征。
标签转移已被应用于检测使用其他方法难以捕获的瞬态或弱PPI体外检测策略。将使用标记转移试剂标记与感兴趣蛋白质相互作用的蛋白质。新的非同位素试剂和方法的开发增强了更简单、更容易获得的标记转移分析。
基于免疫印迹法的远蛋白印迹法也可以检测PPI体外并且不需要保留目标蛋白的天然状态。在该方法中,使用纯化并标记的“诱饵”蛋白质在膜上探测目标“猎物”蛋白质。
两种或两种以上与特定功能目标相互作用的蛋白质的结果可通过几种不同的方式证明。蛋白质相互作用的可测量效应概述如下:
Creative Proteomics拥有一支在蛋白质-蛋白质相互作用研究方面具有特定经验的科学家团队,我们的蛋白质-蛋白质相互作用网络平台将帮助您破译蛋白质-蛋白质相互作用并拓展您的研究前景。
我们的订购程序如下。如果您有任何问题或具体要求,请随时与我们联系。

参考:
1.Turnbull A P,Boyd S M,Walse B.基于片段的药物发现和蛋白质-蛋白质相互作用。《生物化学研究与报告》,2014,4:13-26。