为什么DIA不需要高丰度去除和分级?
答:DIA是一种全扫描技术。质谱仪的整个全扫描范围被划分为几个窗口，每个窗口内的所有离子都被高速、循环地选择、破碎和检测，这样就可以获得样品中所有离子的所有破碎信息，而不会丢失或差异。因此，DIA获得了更高的覆盖信息，同时也最大限度地减少了高丰度蛋白质对质谱扫描的影响。
为什么在DIA的实验路线中必须先进行图书馆建设?
答:DIA全扫描方法获得的数据过于复杂。每个二次谱图都有来自多个主信号的混合信息，通常很难直接匹配理论库。通常需要首先构建地图库，然后利用该库对DIA数据进行高效、准确的分析。
为什么DIA的定量分析能力接近PRM和MRM等针对性技术?
答:DIA定量的原理与靶向技术相似，两者都使用次级片段离子进行定量。
DIA还需要后续验证吗?
答:DIA是一种非靶向技术，其结果最终需要进行靶向验证。然而，DIA的高精度使得后续目标验证具有更高的清晰度和一致性。
DIA适用于什么类型的实验?
答:DIA是一种全息扫描方式，能完整记录样品信息，定量精度高，重现性好，缺漏值少。样品采用保留时间校正的同位素多肽采集，适用于大样本量。up时间间隔可以更大，数据可以被回溯。可用于不同因素影响下的差异蛋白筛选、不同组织蛋白表达谱、疾病分型等。
全息扫描DIA与无标签相比有哪些优点和缺点?
答:两者都可用于差异较大的样本(不同物种，不同组织部位);蛋白质存在/缺失分析，无同位素标记，成本相对较低;样品无限，应用范围广。
LFQ数据的可重复性稍差，并且有更多的缺失值。
DIA具有较好的再现性，可收集所有离子信息。缺点是需要提前建立数据库，数据分析比LFQ复杂。
