蛋白质磷酸化是生物体中最重要的共价修饰之一。磷酸化修饰本身的简单性、灵活性和可逆性,以及磷酸基供体ATP的可用性,使磷酸化修饰成为一种常用的调控手段。蛋白质磷酸化和去磷酸化的可逆过程几乎调控着细胞增殖、发育、分化、细胞骨架调节、细胞凋亡、神经活动、肌肉收缩、代谢和肿瘤发生等生命活动过程。可逆蛋白磷酸化是目前已知的主要信号转导方式。目前已知,人类的许多疾病都是由异常的磷酸化修饰引起的,有些磷酸化修饰是某些疾病的后果。
我们的磷蛋白组服务
Creative Proteomics利用赛默飞尔的Q ExactiveHF质谱平台、Orbitrap Fusion质谱平台等,推出磷酸化定量蛋白质组分析服务技术包,包括蛋白质提取、蛋白水解消化、磷酸化肽富集、肽分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。
我们的磷酸化蛋白质组学平台提供了高度敏感的蛋白质磷酸化检测和准确的定量。磷酸化位点的鉴定可用(可选)。
磷酸蛋白组学服务流程
优势
全面性:磷蛋白组学以全细胞蛋白质为研究对象,包括细胞内具有生命功能的蛋白质,如细胞增殖、细胞分裂、细胞分化等,以及其他相关蛋白质,分析较为全面。
可靠性:传统的蛋白质磷酸化生物学研究往往针对特定的条件,并从两个或多个蛋白质之间的相互作用开始,这有局限性,缺乏整体性的理解。而磷酸蛋白质组学可以检测不同的蛋白质激酶和磷酸酶对同一蛋白质磷酸化水平的影响,因此结果具有通用性和可靠性。
有效性:磷蛋白组学反映了细胞中实际发生的事情,考虑到不同的变量,克服了生物学中增量添加变量的缺点。
探索性:磷蛋白组学研究细胞内蛋白质。与传统的生物研究和蛋白质芯片相比,更容易发现未知的磷酸化位点和磷酸化的蛋白质。如果结合生物技术,可以发现具有磷酸化或去磷酸化功能的酶。
高灵敏度:荧光磷标记的灵敏度高于质谱
高分辨率:从未修饰的形态中有效分离磷酸化蛋白
应用程序
激酶/磷酸酶底物定位
激酶/磷酸酶激活剂的筛选和鉴定(如药物诱导的蛋白质磷酸化)
激酶/磷酸酶抑制剂的筛选和鉴定
信号转导研究(通过磷酸化调节蛋白质功能)
技术平台
三重TOF 5600, Q-Exactive, Orbitrap Fusion™Tribrid™
样品的要求
组织样本:动物、微生物组织湿重> 30mg;种植新鲜组织> 300mg。
10 .细胞样本:细胞体积>7.
体液标本:血容量> 1500 μL。
蛋白提取:总蛋白>900 μg,浓度>1 μg/μL。