血清保存与使用的问答

血清可在常温或-20°C或-80°C保存。长期保存时，建议将血清保存在-80°C。未开封的血清也应储存在-80°C。在2-8°C解冻的血清应尽快使用。

血清应在2-8°C缓慢温和地解冻，以防止蛋白质变性和活性丧失。不建议使用微波炉或热水浴解冻。

在-80°C下储存的血清通常可以保存5年(如果不反复解冻和重新冷冻)。

过期血清不应使用，因为其活性可能降低或含有污染物，可能影响实验结果。

反复的冻融循环可导致血清中蛋白质降解和活性丧失。建议避免超过2-3次冻融循环。

在大多数情况下，血清不需要灭活。失活会导致血清中某些成分的破坏，如氨基酸、维生素和生长因子。只有在血清对实验有特定要求的情况下才考虑失活。

当储存在2-8°C时，血清中的各种蛋白质或脂蛋白可以形成可见的沉淀物，如纤维蛋白原。当纤维蛋白原处于单体状态时，它处于溶解状态，但在冻融过程中，它可以聚集并形成可见的沉淀物。然而，这种现象一般不影响血清的性能。

400g离心血清5分钟后过滤上清，可避免血清沉淀的形成。建议选择合适的滤膜孔径，如0.22um的PES滤膜，以避免滤膜堵塞。为尽量减少血清沉淀的风险，建议将血清分成单次使用的部分，并在-15°C至-20°C保存，避免重复冷冻和解冻或将解冻的血清长时间放置在2-8°C。

丰富蛋白质的消耗可以提高低丰度蛋白质和代谢物的检测。然而，应仔细考虑耗竭法的选择，因为它可能会影响某些蛋白质和代谢物的检测。

是的，不同的血清收集管会影响实验结果。重要的是使用一致的收集管，以尽量减少样品之间的变异性。

是的，采集过程中的溶血会用红细胞成分污染血清，从而影响实验结果。

溶血可通过肉眼检查血清或测量血红蛋白在414 nm处的吸光度来检测。溶血样品应丢弃或单独处理。

来自不同物种的血清可用于代谢和蛋白质组学分析，但它可能需要额外的步骤来去除交叉反应蛋白或鉴定物种特异性蛋白。

是的，在代谢和蛋白质组学分析中，血清可以作为组织样本的替代品，但它可能不能反映组织中代谢和蛋白质组学的全部变化。

血清质量可以根据其透明度、颜色和pH值进行评估。pH值为7.2-7.4的透明和淡黄色血清被认为是优质血清。出现浑浊、血块或强烈的黄色或红色可能表明污染或溶血，并可能影响实验结果。

血清可用于广泛的实验，但其组成可能因来源和制备方法而异。对于某些类型的实验，例如涉及细胞因子或生长因子的实验，可能需要使用无血清培养基或用特定因子补充培养基。

血清是血液凝固和清除血块后剩下的液体部分，而血浆是血液抗凝后收集的液体部分，然后离心去除血细胞。血浆中含有凝血因子，在制备血清的凝血过程中被去除。

血清可以用0.2 μm过滤器消毒，也可以用γ射线或紫外线照射消毒。处理血清时使用无菌技术以避免污染是很重要的。

是的，血清通常被用作细胞培养基的补充，为细胞的生长和增殖提供营养物质和生长因子。然而，重要的是要选择适合特定细胞类型和实验的血清，并测试血清中潜在的污染物或干扰因素。

是的，血清可以作为一抗或二抗的来源用于Western blotting。然而，重要的是测试血清与其他感兴趣的蛋白质的交叉反应性，并优化抗体浓度和培养条件。

胎牛血清来源于胎牛胎儿的血液，由于其生长因子和营养物质含量高，常被用作细胞培养基的补充物。ABS是从成年牛血液中提取的，在细胞培养中使用较少。FBS和ABS的组成可以在批次之间有所不同，应根据实验系统的具体需要进行选择。