蛋白质的磷酸化是生物体中最重要的共价修饰之一。磷酸化修饰本身的简单性、灵活性和可逆性,以及磷酸基供体ATP的可用性,使磷酸化修饰成为一种常见的调控手段。蛋白质磷酸化和去磷酸化的可逆过程几乎调控着细胞增殖、发育、分化、细胞骨架调节、细胞凋亡、神经活动、肌肉收缩、代谢和肿瘤发生等生命活动过程。而可逆蛋白磷酸化是目前已知的主要信号转导模式。现在已经知道,许多人类疾病是由异常磷酸化修饰引起的,一些磷酸化修饰是某些疾病的后果。
我们的磷蛋白质组学服务
创意蛋白质组学利用赛默飞世尔的Q ExactiveHF质谱平台、Orbitrap Fusion质谱平台等,推出磷酸化定量蛋白质组分析服务技术包,包括蛋白质提取、蛋白水解消化、磷酸化肽富集、肽分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析等。
我们的磷酸化蛋白质组学平台提供高度敏感的蛋白磷酸化检测和准确的定量。鉴定磷酸化位点可用(可选)。
磷酸化蛋白质组学服务流程
优势
全面性:磷蛋白质组学以全细胞蛋白质为研究对象,包括细胞中具有生命功能的蛋白质,如细胞增殖、细胞分裂和细胞分化等相关蛋白质,因此分析更加全面。
可靠性:传统的蛋白质磷酸化生物学研究通常针对特定的条件,并从两个或多个蛋白质之间的相互作用开始,这有局限性,缺乏整体的理解。另一方面,磷酸蛋白质组学可以检测不同蛋白激酶和磷酸酶对同一蛋白磷酸化水平的影响,从而使结果具有普适性和可靠性。
有效性:磷蛋白质组学反映了细胞中实际发生的事情,考虑了不同的变量,克服了在生物学中逐渐增加变量的缺点。
探索性:磷蛋白质组学研究细胞内蛋白质。与传统的生物学研究和蛋白质芯片相比,它更容易发现未知的磷酸化位点和磷酸化蛋白。如果结合生物技术,可以找到具有磷酸化或去磷酸化功能的酶。
高灵敏度:荧光磷标签的灵敏度高于质谱法
高分辨率:有效地将磷蛋白从未修饰的形式中分离出来
应用程序
激酶/磷酸酶底物定位
激酶/磷酸酶激活剂的筛选和鉴定(如药物诱导的蛋白磷酸化)
激酶/磷酸酶抑制剂的筛选和鉴定
信号转导研究(通过磷酸化调控蛋白功能)
技术平台
Triple TOF 5600, Q-Exactive, Orbitrap Fusion™Tribrid™
样品的要求
组织样品:动物、微生物组织湿重> 30mg;植株新鲜组织> 300mg。
细胞样品:细胞体积> 107.
体液标本:血清体积> 1500 μL。
蛋白质提取物:总蛋白>900 μg,浓度>1 μg/μL。