脑苷高效色谱分离方法在线调查

1 HPTLC显影槽设置

a)将新配制的显影溶剂添加到槽底，深度约1cm(通常为30 - 50ml)。

b)用配套的玻璃盖关闭罐体，使溶剂系统平衡至少1小时。

2 HPTLC设置

a)操作HPTLC板时一定要戴手套，以避免任何可能干扰TLC染色的污染。

b) HPTLC板应保持在干燥的环境中，如果不是在这种情况下，可以在60-70°C的烤箱中放置约10分钟。

c)用软铅笔在HPTLC上标出样品的位置。样品和标准品应位于板底上方1.5-2厘米处，每边至少2厘米，以避免任何边缘影响。样品与标准品(0.5-1 cm)之间也应间隔1cm。

d)为了提高分离板之间的重复性，在离HPTLC板顶部1-1.5 cm处画一条线，当溶剂前缘到达这条线时将板取下。

3样品加载

a)如果使用干燥的样品，以2:1的体积比将其重悬在氯仿:甲醇溶液中。

b)使用微细毛细管或精细的凝胶装载头装载标准品和样品。每次涂抹之间用吹风机将溶剂蒸发。沿着所画的标记线均匀地装入样品，以提高再现性。根据样品的浓度，可以沉积10 ~ 50 μL的体积。

4色谱显影

a)取下盖子后，小心地将板放入显影室。溶剂(或流动相)通过毛细管作用通过平板，因此应均匀启动，以避免样品之间运行行为的差异。

b)当溶剂前缘到达HPTLC的上线时，取下板。

c)用吹风机用冷空气吹干HPTLC板。

5可视化和定量测定

a)将HPTLC板直立放置在化学罩下的TLC喷雾盒中。

b)使用细雾喷雾器将Orcinol试剂从一个边缘喷到另一个边缘，直到整个表面被覆盖。

c)小心地将HPTLC从喷雾盒中取出，置于加热板或烤箱中，在150°c下加热约10分钟。

d)扫描HPTLC板进行进一步的定量和分析。

参考

1. Bhattacharya, s.k.(2017)。Lipidomics。分子生物学杂志，2009。