蛋白质是由氨基酸脱水缩合而成的大分子化合物,含有氨基端(-NH2, n端)和羧基端(-COOH, c端)。c端是蛋白质重要的结构和功能位点。一些特定的翻译后修饰,如c端切割,会影响蛋白质的结构,从而影响它们的生物学功能。因此,研究该蛋白的氨基酸种类和c端序列有助于揭示该蛋白的结构和功能。
随着蛋白质组学研究的深入,c端测序在蛋白质功能研究中发挥着越来越重要的作用,特别是对于蛋白质生物制药来说,c端测序必不可少。几种新的蛋白质c端测序方法已经建立,具有更高的灵敏度和可重复性,可以应用于蛋白质组水平。
c端测序法
蛋白质c端测序有三种方法:羧基肽酶法、化学法和串联质谱法。目前,较广泛使用的方法是串联质谱法。
羧肽酶和化学方法的策略是通过酶或化学试剂裂解获得c端氨基酸,并结合液相色谱或质谱技术进行氨基酸种类的鉴定。
串联质谱法测定c端氨基酸序列的原理是将蛋白质样品消化成多肽混合物,然后通过串联质谱法对多肽混合物进行分析,结合相应的软件和数据库推断出完整的c端氨基酸序列。
c端测序服务
Creative Proteomics使用串联质谱法进行蛋白质c端测序。我们高效准确的c端测序服务基于先进的ESI和MALDI TOF,可以检测被阻断和修饰的蛋白c端,确认重组蛋白是否完全表达,检测重组蛋白在表达过程中是否断裂,重组蛋白的c端序列是否被修饰等。
特性
不需要羧肽酶消化和化学裂解;
短周期;
精度高,结果准确。
适用于各类c端序列检测。
服务流
样品交付要求
HPLC检测样品的纯度应不低于95%。
蛋白质量至少为50ug,蛋白质浓度不低于0.5mg/ml。
样品应为重组蛋白或已知序列蛋白。