二硫键是蛋白质在细胞内生物合成过程中，在两个半胱氨酸残基的硫原子之间形成的一种翻译后修饰。二硫键在蛋白质折叠中起着重要的作用，在蛋白质的结构和功能中都起着重要的作用。因此，分析蛋白质中的二硫键对揭示蛋白质的高级结构和生物学功能具有重要意义。此外，不正确的二硫键形成或交换会导致抗体聚集，因此了解二硫键对于生物制药生产过程中蛋白质表征至关重要。
图1所示。成熟蛋白质中的二硫键
二硫键分析概述
创造性蛋白质组学提供服务，绘制未知蛋白质的二硫键位点，验证蛋白质样品的二硫键和折叠结构。基本步骤包括肽提取、肽分离和数据分析。
- 多肽提取:我们已经开发出成熟的样品处理技术，如减少机会在体外二硫键交换，最大限度地保持蛋白质的天然结构。
- 肽分析:我们可以用LC-MS/MS绘制二硫键。我们开发了一个先进的平台，包含Orbitrap Fusion, Q Exactive HF, Orbitrap Fusion Lumos。
- 数据分析:使用不同的软件(如pLink-SS和SlinkS)来实现二硫键连接和游离硫分析。此外，还将进行生物信息学分析。
- 详细的报告。我们提供技术报告，包括实验程序、液相色谱和质谱参数、质谱原始数据文件、肽鉴定和强度、蛋白质鉴定和二硫键作图以及生物信息学分析。
样品的要求
可检测多种生物样品，如细胞、动物组织、血液、血清等。
| 类型 | 体积 |
|---|---|
| 蛋白质 | 100 ug |
| 细胞 | 2×107细胞 |
| 动物组织 | 1克 |
| 植物组织 | 200毫克 |
| 血液(添加EDTA) | 1毫升 |
| 血清 | 0.2 - -0.5毫升 |
| 尿液 | 2毫升 |
| 微生物 | 干重:200mg |
| 如果您想了解具体的样品要求，请随时与我们联系。 | |
优势
- 可用于单蛋白水平和蛋白质组学水平的蛋白质分析
- 高度通用的。我们可以分析各种形式的样品，如组织提取物、全细胞裂解物、亚细胞组分等
- 处理量大，自动化程度高，分离能力强
二硫键分析服务的应用:
- 研究新蛋白质中未知的二硫键。
- 分析再折叠蛋白质中的二硫键，以测试蛋白质是否正确折叠。
- 蛋白质治疗中正确二硫键连接的确认。
技术平台
我们通过建立最先进的质谱平台，专注于定量复用蛋白质组学和代谢组学的应用，并优化了样品处理方法和一系列先进的分析方法，为研究的成功提供了强有力的保证。由于每个项目都有不同的要求，请联系我们的专家讨论您的具体需求。我们期待与您的合作。
参考
1.Bošnjak I, bojoviki V， Šegvić-Bubić T，等。生物信息库中蛋白质二硫键在生物信息库中的应用[J]。蛋白质工程，设计与选择，2014,27(3):65-72。